Peamine erinevus – esmane rakukultuur vs rakuliin
Rakkude kultiveerimise ja rakuliinide kasutamisega uurimistöös on uurimisvaldkond teinud suure pöörde. Kunstlikult valmistatud rakkude ja rakuliinidega tehakse erinevaid teste, et hinnata raku käitumist. Enamik inimpõhiseid uuringuid nõuab tulemuste kinnitamiseks rakukultuuri ja rakuliine, eriti kui uuringud põhinevad farmakoloogial ja ravimite avastamisel. Primaarne rakukultuur on kultuur, mis on valmistatud rakkude otsesel isoleerimisel mehaaniliste või ensümaatiliste meetoditega. Rakuliin valmistatakse primaarse rakukultuuri pideva passaažiga, et saada rakuliin, mis on omandanud homoloogsed märgid. Peamine erinevus primaarse rakukultuuri ja rakuliini vahel on nende passaažikordade arv. Primaarne rakukultuur isoleeritakse otse, samas kui rakuliin valmistatakse primaarse rakukultuuri mitu korda passaažiga.
Mis on esmane rakukultuur?
Primaarne rakukultuur on rakukultuuri preparaat, mille käigus eraldatakse rakud otse allikast mehaaniliste või ensümaatiliste meetodite abil. Rakud eraldatakse trüpsiniseerimise või mittetrüpsiniseerimise meetoditega. Primaarseid rakukultuure kasvatatakse sobivas kasvusöötmes, mis sisaldab kasvufaktoreid, hormoone, lipiide ja muid määratlemata komponente. Teatud söötmetega peab kaasas olema seerum. Sööde tagab, et kasvutingimused on optimeeritud ja rakud jäävad ellu optimaalsetes tingimustes. Rakke saab isoleerida erinevatest koeallikatest, näiteks maksakoest, endoteelist ja närvikoest inimestel või kõrgematel loomadel trüpsiniseerimise teel.
Rakkude eraldamisel taimedest ja mikroorganismidest kasutatakse spetsiaalseid ekstraheerimisprotseduure, kus kasutatakse nii mehaanilisi kui ka keemilisi meetodeid. Neid isoleeritud rakke saab immobiliseerida tahkele alusele või mitme põlvkonna jooksul passida, et areneda rakuliiniks.
Primaarsed rakukultuurid on peamiselt kahte tüüpi; Adherentsed rakukultuurid ja suspensioonrakukultuurid. Adherentsed primaarsed rakukultuurid sõltuvad kinnituskohast ja vajavad kasvuks tugevat tuge. Adherentsed primaarsed rakukultuurid pärinevad peamiselt kudedest või elunditest. Suspensiooni primaarsed rakukultuurid on kinnituskohast sõltumatud ja kasvavad vedelas söötmes. Suspensioonikultuure tuleb kasvufaasis pidev alt loksutada. Suspensiooni primaarsed rakukultuurid võib tuletada otse verest.
Primaarsete rakukultuuride eluiga on suhteliselt lühem, kuid primaarsetest rakukultuuridest in vitro tingimustes saadud teave on paljude uuringute aluseks. Need on kasulikud rakkude omaduste, nii morfoloogilise kui ka keemilise käitumise uurimiseks.
Mis on rakuliin?
Rakuliinid on teadusuuringutes laialdaselt kasutusel ja praegu on sellised rakuliinid nagu vähirakuliinid, maksarakuliinid ja neerurakuliinid kaubanduslikult saadaval teadusuuringuteks. Rakuliinid valmistatakse primaarse rakukultuuri pideva passaažiga. Passaging viitab subkultuuriprotsessile, mille käigus rakukultuurid aretatakse rakuliiniks. Need rakuliinid on kultuurid kahe- või kolmemõõtmelistes maatriksites ja neid hoitakse rakuliinidena.
Rakuliinid liigitatakse lõplikeks ja pidevateks rakuliinideks. Piiratud rakuliinid läbivad kindla arvu passaaži (20–30 passaaži). Pärast vajaliku arvu passaažide läbimist siseneb rakuliin vananemise faasi. Neid rakke on lihtne käsitseda, kuna nende kasv on kindel. Pidevaid rakuliine nimetatakse ka immortaliseeritud rakuliinideks. Nendel rakuliinidel ei ole kindlat passaažide arvu. Nad kasvavad lõputult ja on seega võimelised omandama mutatsioone. Seetõttu on pidevad rakuliinid kergesti muteerunud ja seetõttu muutuvad nende morfoloogilised ja geneetilised omadused erinev alt piiratud rakuliinidest.
Joonis 01: Lahtri rida
Rakuliini kasutatakse, kuna see on mugavam kui primaarse rakukultuuri kasutamine, kuna seda saab teatud aja jooksul ikka ja jälle kasutada. Kuid see on rohkem altid mutatsioonidele ja saastumisele, kuna nende levik suureneb.
Millised on esmase rakukultuuri ja rakuliini sarnasused?
- Nii rakukultuuri kui ka rakuliini tüüpi rakke kasutatakse teadusuuringutes, et uurida raku morfoloogilisi, keemilisi ja geneetilisi omadusi.
- Nii rakukultuuri kui ka rakuliini tüüpi rakke ekstraheeritakse mehaaniliste ja ensümaatiliste meetoditega.
- Nii rakukultuuri kui ka rakuliini tüüpi rakud nõuavad kasvukeskkonda ja spetsiifilisi kasvutingimusi.
- Nii rakukultuuri kui ka rakuliini tüüpi rakud on altid mutatsioonidele.
Mis vahe on primaarsel rakukultuuril ja rakuliinil?
Esmane rakukultuur vs rakuliin |
|
| Primaarne rakukultuur on kultuur, mis on valmistatud rakkude otsesel isoleerimisel mehaaniliste või ensümaatiliste meetoditega. | Rakuliin valmistatakse ette primaarse rakukultuuri pideva passaažiga, et saada rakuliin, mis on omandanud homoloogsed märgid. |
| Lõikude arv | |
| Primaarseid rakukultuure ei passida, rakke hoitakse kultiveerimistingimustes. | Rakud passeeritakse rakuliinide moodustamisel kindl alt või lõputult. |
| Tüübid | |
| Adherent primaarne rakukultuur ja suspensioon primaarne rakukultuur on kahte tüüpi primaarsed rakukultuurid. | Lõplik rakuliin ja pidev rakuliin on kahte tüüpi rakuliine. |
| Eluiga | |
| Primaarsete rakukultuuride eluiga on lühike. | Rakuliinidel on pikem eluiga. |
Kokkuvõte – esmane rakukultuur vs rakuliin
Primaarseid rakukultuure ja rakuliine kasutatakse laialdaselt teadusuuringutes, et uurida erinevate rakkude käitumismustreid erinevates tingimustes ja erinevates farmakoloogilistes aspektides. Primaarsed rakukultuurid eraldatakse otse lähteorganist või -koest ja neid kasvatatakse söötmes. Tingimused on optimeeritud konkreetsete rakkude kasvu jaoks. Seevastu rakuliinid valmistatakse primaarsete rakukultuuride passaažiga piiratud või lõpmatu arv kordi. Rakuliinid on kaubanduslikult saadaval ja on teadlaste seas populaarsed kasutuslihtsuse tõttu.
