Peamine erinevus – Gram Stain vs kultuur
Grammivärvimine on värvimistehnika, mida kasutatakse bakterite eristamiseks kahte rühma vastav alt nende rakuseina peptidoglükaanikihi paksusele. Kultuur on meetod mikroorganismide kasvatamiseks ja säilitamiseks laboritingimustes erinevate analüüside jaoks. Peamine erinevus grammide peitsi ja kultuuri vahel on nende funktsioon; grammi tüvi bakterite värvimistehnika, kus kultiveerimine on meetod mikroorganismide kasvatamiseks ja säilitamiseks.
Mis on Gram Stain?
Grammivärvimine on oluline diferentsiaalvärvimise tehnika, mida kasutatakse bakterite tuvastamiseks mikrobioloogias. Selle tehnika võttis kasutusele Taani bakterioloog Hans Christian Gram 1884. aastal. Gramvärvimine jagab bakterid kahte suurde rühma: grampositiivsed ja gramnegatiivsed; need on bakterite klassifitseerimisel ja tuvastamisel väga olulised. Bakterite iseloomustamise esimese etapina viiakse läbi gramvärvimine.
Bakterid on rühmitatud nende rakuseina erinevuste alusel. Grampositiivsete bakterite rakuseinas on paks peptidoglükaani kiht, samas kui gramnegatiivsete bakterite rakuseinas on õhuke peptidoglükaani kiht, nagu on näidatud joonisel 01. Gram-värvimise tulemus põhineb peptidoglükaani kihi paksuse erinevusel. rakusein.
Joonis 1: grampositiivsed bakterid ja gramnegatiivsed bakterid
Grammi värvimine viiakse läbi nelja erineva reaktiiviga, nimelt; esmane peits, peits, värvieemaldusaine ja vastuplekk. Kristallviolet ja safraniin toimivad vastav alt primaarse ja vastuplekkina, grammides joodi ja 95% alkoholi on vastav alt peitsina ja värvieemaldajana.
Grammi peitsimise põhietapid
- Puhtale slaidile valmistatakse bakterite äige, see fikseeritakse kuumusega ja jahutatakse.
- Smear ujutatakse 1–2 minutiks üle kristallvioletiga.
- Liigsete plekkide eemaldamiseks loputatakse määrdeainet aeglaselt voolava kraaniveega.
- Mägule kantakse 1 minutiks grammi joodi.
- Mäde loputatakse aeglaselt voolava kraaniveega
- Smear pestakse 95% alkoholiga 2–5 sekundit ja loputatakse aeglaselt voolava kraaniveega.
- Mädist värvitakse safraniiniga 1 minut
- Määrd loputatakse aeglaselt voolava kraaniveega, kuivatatakse ja vaadeldakse mikroskoobi all.
Gramplekimise lõpus täheldatakse gramnegatiivseid baktereid roosat värvi, grampositiivseid baktereid aga lilla värvusega, nagu on näidatud joonisel 02. Gram-määruse tulemuse määrab paksus peptidoglükaani kiht nende rakuseinas. Värvusetustamise etapis eemaldatakse esmane plekk ja peitsaine gramnegatiivsetelt bakteritelt kergesti ja muutuvad värvituks, kuna neil on õhuke peptidoglükaanikiht. Esmane plekk säilib grampositiivsetes bakterites, kuna neil on paks peptidoglükaanikiht. Vastupeits ei ole grampositiivsete bakterite puhul efektiivne, kuna esmane plekk jääb kinni. Seega on grampositiivsed bakterid nähtavad esmase plekivärvi, st lilla värviga. Vastupeits värvib gramnegatiivseid baktereid ja on nähtav safraniini värviga. Seetõttu on grammi järgi lihtne bakterid kahte rühma liigitada ning see on väärtuslik bakterite eristamisel ja tuvastamisel.
Joonis 2: Grami tüvi
Mis on kultuur?
Mikroobne kultuur on meetod mikroorganismide kultiveerimiseks ja säilitamiseks laboritingimustes erinevatel eesmärkidel. Kultuure kasvatatakse tahkes, pooltahkes ja vedelas söötmes, lähtudes mikroorganismide kultiveerimise tüübist ja eesmärgist. Kultuurid on varustatud vajalike toitainete ja mikroorganismide jaoks vajalike kasvutingimustega. Kultuurisöötmes on erinevad komponendid, nagu energiaallikas, süsinikuallikas, lämmastikuallikas, mineraalid, mikroelemendid, vesi, tahkeaine jne. Optimaalne temperatuur, hapnik ja pH tuleks reguleerida vastav alt kasvatatava mikroorganismi tüübile.
Mikroobikultuure on erinevat tüüpi; näiteks partiikultuur, pidevkultuur, torkekultuur, agarplaadikultuur, puljongikultuur jne. Vastav alt kasvusubstraadi koostisele on erinevat tüüpi söötmeid, mida tuntakse sünteetiliste, poolsünteetiliste ja looduslike söötmetena. Mikroobikultuurid valmistatakse steriilsetes tingimustes spetsiaalses kambris, mida nimetatakse laminaarseks õhuvooluks. Kasvukeskkond ja klaasnõud steriliseeritakse enne soovitud mikroorganismi nakatamist. Õigetes steriilsetes tingimustes viiakse sihtmikroorganism steriliseeritud toitainekeskkonda ja inkubeeritakse optimaalsel temperatuuril. Söötmes kasvab ja paljuneb mikroorganism, kasutades selleks ettenähtud toitaineid.
Joonis 3: Bakterikultuur plaadil
Mis vahe on Gram Stainil ja kultuuril?
Gram Stain vs kultuur |
|
| Gramsi tüvi on diferentsiaalvärvimise tehnika, mida kasutatakse bakterite eristamiseks ja tuvastamiseks. | Mikroobikultuur on meetod mikroorganismide kasvatamiseks laboris. |
| Komponendid | |
| See kasutab erinevaid reaktiive, sealhulgas kahte plekki. | Selles kasutatakse erinevaid söötmeid, näiteks tahket, pooltahket ja vedelat söödet, mis koosneb toitainetest ja muudest vajalikest tingimustest. |
| Põhifunktsioonid | |
| See võimaldab rühmitada bakterid kahte rühma: gramnegatiivsed ja grampositiivsed. | See võimaldab mikroorganismide paljunemist erinevatel eesmärkidel. |
| Base | |
| Grami värvimise tulemus põhineb rakuseina peptidoglükaanikihi erinevustel. | Mikroorganismid kasvavad ja paljunevad kultuurisöötmes. |
| Tulemus | |
| Gramnegatiivsed bakterid on nähtavad roosa värviga ja grampositiivsed bakterid on nähtavad lilla värvusega. | Plaadidel on näha mikroorganismide kolooniad. Vedelal söötmel on mikroorganismid suspendeeritud kujul. |
Kokkuvõte – Gram Stain vs kultuur
Mikroobikultuure valmistatakse ette ja hoitakse laboritingimustes erinevatel eesmärkidel, nagu säilitamine, testimine, keemiline puhastamine jne. Grammivärvimine on värvimisprotseduur, mis eristab bakterid kahte põhirühma, mida nimetatakse gramnegatiivseteks ja grampositiivseteks bakteriteks. Seetõttu on grammivärvi ja kultuuri erinevuseks see, et grammide värvimine on bakterite värvimistehnika, samas kui kultuur on meetod mikroorganismide kasvatamiseks ja säilitamiseks laborites.
