Põhierinevus agar-kaevu ja ketaste difusioonimeetodi vahel seisneb selles, et agar-kaevu difusioonimeetodi puhul täidetakse ekstrakti lahus agar-söötmele loodud auku või süvendisse, agarketta difusioonimeetodi puhul aga filterpaberi kettale. testlahust sisaldav asetatakse agari pinnale.
Mikroorganismid on paljude haiguste tekitajad. On erinevaid antimikroobseid aineid, mis tapavad mikroorganisme ja pärsivad või peatavad nende kasvu. Antimikroobse toime tuvastamiseks on saadaval erinevad skriinimis- ja hindamismeetodid. Nende hulgas on agarakaevu difusioonimeetod ja agariketta difusioonimeetodid tavaliselt in vitro analüüsis kasutatavad meetodid, mis on agari difusioonimeetodid. Neid meetodeid kasutatakse laialdaselt, kuna need ei nõua spetsiifilisi seadmeid ega reprodutseeritavuse ja standardimise täiendavat hindamist. Mõlemad meetodid sõltuvad antimikroobse aine difusioonist läbi agarisöötme.
Mis on agari kaevu difusioonimeetod?
Agar-kaevu difusioonimeetod on üks odavamaid ja lihtsamaid in vitro antimikroobse toime teste. Seda meetodit kasutades saab taimeekstrakte ja mikroobiekstrakte skriinida antimikroobse toime suhtes patogeensete mikroobiliikide suhtes. Selle meetodi puhul inokuleeritakse agarplaati patogeensete bakteriliikidega, kasutades laotatud plaadi tehnikat. Selleks jaotatakse teadaolev kogus mikroobset lahust agari pinnale, kasutades klaaslaoturit. Seejärel luuakse steriilse korgipuurriga aseptiliselt auk või kaev (läbimõõt 6–8 mm). Järgmisena tuleb süvend täita ekstraktilahusega (testlahusega) ning seejärel inkubeerida plaate sobival temperatuuril ja sobivates tingimustes. Inkubeerimisel difundeerub antimikroobse ekstrakti lahus järk-järgult läbi agarisöötme ja pärsib testitud bakteriliikide kasvu. Lõpuks saab jälgida inhibeerimistsooni ja mõõtmiseks võetakse tsooni läbimõõt.
Mis on agariketta difusioonimeetod?
Sarnaselt agar-kaevu difusioonimeetodile on agariketta difusioonimeetod ka laborites rutiinselt kasutatav antimikroobse tundlikkuse testimise meetod. Selle meetodi puhul hoitakse agarisöötmel filterpaberist ketast, mis sisaldab uuritavat lahust. Enne seda tuleks agariplaati inokuleerida uuritava mikroorganismiga. Seejärel asetatakse agarsöötmele filterpaberi ketas, mis sisaldab teadaolevas kontsentratsioonis ekstraktilahust. Seejärel inkubeeritakse plaate sobivates tingimustes.
Joonis 02: Agariketta difusioonimeetod
Inkubeerimisel difundeerub ekstraktilahus läbi agarisöötme ja pärsib mikroobide kasvu. Pärast inkubeerimist mõõdetakse inhibeerimistsooni läbimõõt ja võrreldakse seda.
Millised on agari kaevu ja ketta difusioonimeetodi sarnasused?
- Agar-kaevu ja ketaste difusioonimeetodid on kahte tüüpi antimikroobse tundlikkuse testimise meetodeid, mis on agari difusioonimeetodid.
- Mõlemat meetodit on lihtne teostada ja need on kulutõhusad.
- Neid tehakse laborites rutiinselt.
- Seetõttu on need in vitro
- Mõlema meetodiga on võimalik hõlps alt testida mitut mikroobi või mitut ekstrakti.
- Ka tulemuste tõlgendamine on mõlema meetodi puhul lihtne.
- Lisaks ei vaja need teatud tüüpi seadmeid.
- Kuid mõlemad meetodid ei suuda eristada bakteritsiidset ja bakteriostaatilist toimet.
- Lisaks ei sobi mõlemad meetodid minimaalse inhibeeriva kontsentratsiooni määramiseks.
Mis vahe on agari kaevu ja ketta difusioonimeetodil?
Agar süvendi difusioonimeetod on antimikroobse toime test, mille käigus agarisöötmesse luuakse auk ja sellele lisatakse ekstraktilahus. Vahepeal on agariketta difusioonimeetod antimikroobse aktiivsuse test, mille käigus agarisöötmele asetatakse ekstraktilahuse teadaoleva kontsentratsiooniga filterpaberist ketas. Niisiis, see on peamine erinevus agari kaevu ja ketta difusioonimeetodi vahel. Seetõttu lisatakse ekstraktilahus agari süvendisse või agar-augu difusioonimeetodil, ekstraktilahus aga filterpaberi kettale agariketta difusioonimeetodil. Seega ei kasuta agar-kaevu difusioonimeetod filterpaberi ketast, samas kui agar-ketta difusioonimeetod agarisöötmesse agari auke ei tekita.
Enne on agar-kaevu ja ketaste difusioonimeetodi erinevuste kõrvuti võrdlus.
Kokkuvõte – agar-kaev vs ketta difusioonimeetod
Agar-kaevu ja ketaste difusioonimeetodid on kahte tüüpi antimikroobse tundlikkuse testimise meetodeid. Mõlemad meetodid on lihtsad ja odavad in vitro meetodid. Agar-kaevu difusioonimeetodil luuakse söötmele auk või süvend ning seejärel lisatakse süvendisse ekstraktilahus, et hinnata antimikroobset aktiivsust. Seevastu agariketta difusioonimeetodi puhul lisatakse ekstraktilahus filterpaberi kettale ja asetatakse seejärel agari pinnale. Niisiis, see on peamine erinevus agari kaevu ja ketaste difusioonimeetodi vahel.
