Põhiline erinevus radioimmuunanalüüsi ja immunoradiomeetrilise analüüsi vahel seisneb selles, et radioimmunotestis kombineeritakse mõõdetav proov või ühend enne kombineerimist radioaktiivse antigeeniga, samas kui immunoradiomeetrilises testis kombineeritakse proov või ühend kohe radiomärgistatud ainega. antikehad.
Immunoanalüüs on biokeemiline test, mis tuvastab makromolekulide olemasolu või kontsentratsiooni lahuses, kasutades antikeha või antigeeni. Antigeenide mõõtmiseks proovis kasutatakse fluorestseeruvaid ja radioaktiivseid antikehi. Algselt kasutati antikehi seerumivalgu analüüsiks sadestamismeetodites, nagu immunosadestamine, immunodifusioon ja immuunelektroforees. Praegu kasutatakse ravimite, kasvajamarkerite ja hormoonide mõõtmiseks ülitundlikke meetodeid, nagu radioimmunoanalüüs ja immunoradiomeetrilised analüüsid.
Mis on radioimmunoanalüüs?
Radioimmunoanalüüs (RIA) on immuunanalüüs, mis kasutab radioaktiivseid elemente järk-järgult antigeeni-antikeha komplekside moodustamiseks. RIA kasutab proovis oleva antigeeni koguse tuvastamiseks tavaliselt radioaktiivseid antikehi. RIA on väga spetsiifiline ja väga tundlik in vitro test. RIA aluseks olev põhimõte on siduv konkurentsiga. Siin konkureerib radioaktiivne antigeen mitteradioaktiivse antigeeniga konstantse koguse antikeha või retseptori sidumissaitide pärast. RIA nõuab erilitsentse ja ettevaatusabinõusid, kuna kasutatakse radioaktiivseid aineid ja see on endiselt üks kõige odavamaid meetodeid.
Joonis 01: Immuunanalüüs
RIA ajal muudetakse teadaolev kogus antigeeni sageli radioaktiivseks, märgistades selle türosiiniga seotud joodi gamma-radioaktiivsete isotoopidega. Seejärel kombineeritakse see antigeen teadaoleva koguse antikehaga. Siin seostuvad nii antigeen kui ka antikeha spetsiifiliselt üksteisega. Seejärel lisatakse vereseerumi proov, et algatada spetsiifiliste antikehadega konkureeriv reaktsioon märgistatud antigeenide ja märgistamata antigeenide vahel seerumis. Selles reaktsioonis vabastavad antikehad teatud koguse märgistatud antigeeni. See kogus on võrdeline märgistatud ja märgistamata antigeeni suhtega. Lõpuks genereeritakse patsiendi vereseerumis sisalduva antigeeni koguse tuletamiseks seondumiskõver.
Mis on immunoradiomeetriline analüüs?
Immunoradiomeetriline test (IRMA) on immuunanalüüs, mis kasutab radioaktiivselt märgistatud antikehi. IRMA-s märgistatakse antikehad radioisotoopide abil. Need antikehad seonduvad konkreetses proovis esinevate antigeenidega. Positiivses proovis seonduvad radioaktiivselt märgistatud antikehad antigeenide vabade epitoopidega. See moodustab antigeeni-antikeha kompleksi.
Teise reaktsiooni käigus eemaldatakse sidumata märgistatud antikehad, kasutades tahke faasi antigeeni. Ülejäänud radioaktiivsete antikehade arv lahuses on otsene funktsioon antigeeni kontsentratsioonist. IRMA on tuntud kui reaktiivi liiganalüüs, kus reagendina kasutatakse radioaktiivselt märgistatud antikehade liigset kogust. Siin lastakse märgistatud antikeha või antigeeni liigkontsentratsioonil reageerida. Viimase etapina eraldatakse antigeeniga seotud ja vabad antikehad ning antigeeniga seotud fraktsiooniga tehakse radioaktiivsed analüüsid. Siin on fraktsiooni aktiivsus otseselt võrdeline antigeeni kontsentratsiooniga.
Millised on radioimmuunanalüüsi ja immunoradiomeetrilise analüüsi sarnasused?
- Nii radioimmunoanalüüs kui ka immunoradiomeetriline analüüs on immuunanalüüsid, mis kasutavad radioaktiivseid elemente antigeeni-antikeha komplekside järkjärgulisel moodustamisel.
- Nad moodustavad antigeen-antikeha kompleksi.
Mis vahe on radioimmuunanalüüsil ja immunoradiomeetrilisel analüüsil?
Radioimmunoanalüüs on immunoanalüüs, mis määrab antikehade tasemed radioisotoobiga märgistatud antigeeni abil, samas kui immunoradiomeetriline test on reaktiivi liiganalüüs, mis kasutab radioaktiivselt märgistatud antikehade liigset kontsentratsiooni. Seega on see peamine erinevus radioimmunotesti ja immunoradiomeetrilise testi vahel. IRMA suudab pakkuda kõrgemat tundlikkust kui RIA. RIA puhul märgistatakse antigeenid joodi gamma-radioaktiivsete isotoopidega, IRMA antikehades aga joodi isotoopide abil. Niisiis, see on ka erinevus radioimmunotesti ja immunoradiomeetrilise analüüsi vahel. Kuna IRMA on üleliigse reaktiivi tehnika, tehakse analüüs lühema ajaga kui RIA.
Järgmine tabel võtab kokku erinevused radioimmuunanalüüsi ja immunoradiomeetrilise analüüsi vahel.
Kokkuvõte – radioimmunoanalüüs vs immunoradiomeetriline analüüs
Radioimmunoanalüüs on immuunanalüüs, mis kasutab radioaktiivseid elemente järk-järgult, et määrata antikehade taset. RIA kasutab tavaliselt radioaktiivseid antikehi. Radioaktiivne antigeen konkureerib mitteradioaktiivse antigeeniga konstantse koguse antikeha või retseptori sidumissaitide pärast. Immunoradiomeetriline analüüs on immunoanalüüs, mida tehakse proovi antigeeni taseme määramiseks, kasutades radioaktiivselt märgistatud antikehi. Need antikehad seonduvad konkreetses proovis esinevate antigeenidega. Iga analüüsi lõpus moodustub antigeen-antikeha kompleks. Analüüside tulemuste saamiseks joonistatakse sidumiskõver. Radioimmuunanalüüsis on märgistatud antigeeni kogus võrdeline märgistatud ja märgistamata antigeeni suhtega, kuid immunoradiomeetrilises testis on antigeeniga seotud fraktsiooni aktiivsus otseselt proportsionaalne antigeeni kontsentratsiooniga. See on kokkuvõte erinevusest radioimmunoanalüüsi ja immunoradiomeetrilise analüüsi vahel.
