Põhiline erinevus CLIA ja ECLIA vahel seisneb selles, et CLIA kasutab kemoluminestsentsi tekitamiseks keemilist meetodit, samas kui ECLIA kasutab elektrokeemilist meetodit kemoluminestsentsi signaalide genereerimiseks immunoanalüüsi tehnikas.
Immuunanalüüse kasutatakse laialdaselt haiguste või infektsioonidega seotud valkude tuvastamiseks ja kvantifitseerimiseks. Seetõttu tuginevad nad peamiselt antikeha-antigeeni sidumise kontseptsioonile. Immunoanalüüse on mitut tüüpi ja kemoluminestsents-immunoanalüüsid on üks selline esilekerkiv arengutehnika. Nii CLIA kui ka ECLIA kasutavad kemoluminestsentsindikaatoreid.
Mis on CLIA?
Chemiluminescent Immunoassay (CLIA) on teatud tüüpi immuunanalüüs, mille tuvastamiseks kasutatakse luminestsentsmolekuli. Molekuli kiiratav luminestsents tuvastatakse spektrofotomeetril, tavaliselt lainepikkusel 300–800 nm. Kemoluminestsents põhjustab aatomite ergastamist ja tehnika tuvastab, et eksergoonilised keemilised reaktsioonid on ergastuse tekitamiseks kõige sobivam energiaallikas.
CLIA tehnikas kasutatakse kahte peamist meetodit: otsene CLIA tehnika ja kaudne CLIA tehnika. Otsene CLIA tehnika kasutab otseseid luminofoorimarkereid, mis on seotud sihtmärgiga, samas kui kaudne CLIA meetod kasutab ensümaatilisi markereid. Otsesed luminofoorimarkerid hõlmavad happe- ja ruteeniumestreid, samas kui kaudsete markerite hulka kuuluvad leeliseline fosfataas koos adamantüül-1,2-dioksetaanarüülfosfaadi (AMPPD) substraadiga ja mädarõika peroksidaas, mille substraadiks on luminool või selle derivaadid.
Joonis 01: Kemiluminestsents
CLIA peamised eelised on funktsionaalsuse lai dünaamiline ulatus, signaali edastamise kõrge intensiivsus, taustahäirete puudumine, kõrge spetsiifilisus, kiirus, stabiilsus ja ühilduvus erinevate analüüsiprotokollidega. Seevastu nende kõrge hind ning piirangud antigeeni tuvastamise ja testimise paneelide osas on CLIA puudused.
Mis on ECLIA?
Electrochemiluminescence Immunoassay (ELCIA) on uudne immuunanalüüsi arendamise tehnika, mis kasutab elektrokemiluminestsentsi kontseptsiooni. Elektroluminestsentsi mõistes tekivad vaheühendid elektrokeemiliselt. Need elektrooniliselt genereeritud vaheühendid jõuavad seejärel ergastatud olekusse ja põhjustavad valguse emissiooni. Lainepikkus, milles valgust kiirgab, vastab energiavahele. Seega tekib kemiluminestsents tänu sellele, et elektroodil tekib elektrokeemiliselt üks või mitu reagenti.
ECLIA on kasulik kõrge tundlikkuse ja spetsiifilisusega analüütiline rakendus. Seda kasutatakse peamiselt erinevate patoloogiliste ja meditsiiniliste seisunditega seotud valkude tuvastamiseks. Selle peamisteks eelisteks on laiem dünaamiline ulatus, mitmekülgsus, ruumiline ja ajaline juhtimine elektroodide potentsiaalide rakendamisel, kõrge tundlikkus kuni pikomolaarsete vahemikeni. Kuid asjaolu, et see nõuab asjatundlikku käsitsemist ja sellega seotud kõrged kulud, on selle puudused.
Millised on CLIA ja ECLIA sarnasused?
- Mõlemad tehnikad põhinevad antigeeni ja antikeha sidumise kontseptsioonil.
- Lisaks kasutatakse mõlemat peamiselt valgu kvantifitseerimisel põhineva haiguste diagnostika jaoks.
- Mõlemad on tundlikud ja spetsiifilised komplektimeetodid.
- Nad kasutavad tuvastamiseks kemoluminestsentsi mõistet.
- Neid saab automatiseerida.
- Mõlemad nõuavad tuvastamiseks spektrofotomeetrit.
- Mõlemal on lai dünaamiline ulatus.
- Need on kulukad tehnikad.
Mis vahe on CLIA ja ECLIA vahel?
CLIA on immuunanalüüsi tehnika, mis kasutab kemoluminestsentsi teooriat, samas kui ECLIA on immuunanalüüsi tehnika, mis kasutab elektrokeemia teooriat koos kemoluminestsentsiga. Niisiis, see on peamine erinevus CLIA ja ECLIA vahel. Seetõttu kasutab CLIA keemilisi reaktsioone, mis viivad kemoluminestsentssignaalide tekkeni, samas kui ECLIA kasutab elektrokeemilisi reaktsioone, mis viivad kemoluminestsentssignaalide tekkeni.
Allpool olev infograafik CLIA ja ECLIA erinevuste kohta näitab rohkem võrdlusi mõlema tehnika vahel.
Kokkuvõte – CLIA vs ECLIA
CLIA ja ECLIA on mõlemad tehnikad, mis mängivad haiguste diagnostikas olulist rolli. Need on täiustatud immunodiagnostika meetodid, mis põhinevad antikeha-antigeeni sidumise kontseptsioonil. Peamine erinevus CLIA ja ECLIA vahel on kemoluminestsentsi tekitamise meetod. Kui CLIA kasutab keemilisi reaktsioone kemoluminestsentsi tekitamiseks pärast antikeha-antigeeni sidumist, siis ECLIA kasutab kemoluminestsentsi tekitamiseks elektrokeemilisi reaktsioone. Mõlemad tehnikad on aga kiired ja spetsiifilised.
