Peamine erinevus – kleepuvad vs suspensioonrakuliinid
Rakuliin on püsiv alt väljakujunenud rakukultuur, mida saab eritingimustes paljundada ja kasvatada. Uurimise hõlbustamiseks hoitakse rakuliinidena mitmeid rakuliine, nagu vähirakuliinid, hepatotsüüdid ja luuüdirakud. Rakuliinid valmistatakse primaarsetest kultuuridest ja need võivad olla peamiselt kahte tüüpi, nimelt adherentsed rakukultuurid ja suspensioonrakukultuurid. Seega nimetatakse nendest kultuuridest saadud rakuliine kleepuvateks rakuliinideks ja suspensioonrakuliinideks. Adherentsed rakuliinid on rakuliinid, mille primaarsed kultuurid on kinnitatud tahkele toele ja seega on need kinnituskohast sõltuvad rakud. Suspensioonrakuliinid on rakuliinid, mille kultuurid on vedelas söötmes suspendeeritud ja rakud jäävad seega vedelasse söötmesse. Need ei sõltu kinnituskohast. Peamine erinevus kleepuva ja suspensiooni rakuliinide vahel on rakkude sõltuvus ankurdamisest. Kleepuvad rakuliinid vajavad oma kasvuks tugevat tuge, seega sõltuvad need kinnituskohast, samas kui suspensioonrakuliinid on kinnituskohast sõltumatud ega vaja kasvuks tugevat tuge.
Mis on adherentsed rakuliinid?
Kinduvad rakuliinid on rakuliinid, mis sõltuvad kinnituskohast. Seetõttu vajavad need rakuliinid oma kasvuks stabiilset tuge. Enamik ekstraheeritud selgroogsete rakkudest (välja arvatud vereloome rakud) sõltuvad kinnituskohast. Seetõttu kultiveeritakse enamikku selgroogsete rakke koos adherendiga, mis tagab rakkude ühtlase kasvu.
Enamik kleepunud rakuliine on rajatud koekultuuriga töödeldud veresoones ja nende kasv piirdub veresoone või adherendi piirkonnaga. Rakkude töötlemisel adherentsete rakuliinide kultiveerimiseks tuleks rakud eraldada trüpsiniseerimise teel ja seejärel rakendada korduvaid passaažitehnikaid, et luua kleepuvad rakuliinid. Adherentsetest kultuuridest valmistatud rakuliinide levinumad rakendused on tsütoloogias ja tsütogeneetikas. Neid kasutatakse ka uurimiseesmärkidel.
Mis on suspensioonrakuliinid?
Suspensioonrakuliinid on kinnituspunktist sõltumatud. Need on saadud suspensioonkultuurist, mis võib kergesti kasvada suspendeeritud vedelas söötmes. Suspensiooni rakukultuure tuleks nende kasvu säilitamiseks pidev alt loksutada. Inimese vereloome rakke kasvatatakse peamiselt suspensioonkultuuridena ja seega säilitatakse neid suspensioonrakuliinidena, kui neid kasutatakse uurimiseesmärkidel.
Suspensioonirakuliinide hooldamine nõuab pidevat segamist ja väheseid passaažiprotseduure. Suspensioonirakkude kasvu piirab rakkude kontsentratsioon söötmes. Seega vähenevad aja jooksul kasvufaktorid ja söötme koostisosad, mis piirab rakkude kasvu.
Joonis 01: Pseudomonas spp. suspensioonikultuur
Suspensioonrakuliinid on kaubanduslikus tootmises kõige laialdasem alt kasutatav primaarsete rakuliinide tüüp. Enamikku mikroobirakke hoitakse suspensioonrakkudena, kus neid kasutatakse kasulike sekundaarsete metaboliitide, näiteks antibiootikumide, vitamiinide, aminohapete ja valkude ekstraheerimiseks. Suspensioonrakuliinide kultuurid annavad palju kõrgemaid tooteid kui kleepuvad rakuliinid ning need on vähem töömahukad ja nõuavad vähem kulutusi võrreldes kleepuvate rakuliinidega.
Millised on kleepuvate ja suspensioonrakuliinide sarnasused?
- Nii adherentsed kui ka suspensioonrakuliinid on saadud primaarsetest rakukultuuridest.
- Nii kleepuvad kui ka suspensioonrakuliinid vajavad maksimaalse kasvu võimaldamiseks optimaalseid söötmetingimusi ja kasvutingimusi.
- Nii kleepuvad kui ka suspensioonrakuliinid valmistatakse ette in vitro tingimustes ja neid saab säilitada spetsiaalsetes säilitustingimustes.
- Nii kleepuvad kui ka suspensioonrakuliinid vajavad saagise suurendamiseks pidevat passaaži.
- Nii adherentseid kui ka suspensioonrakuliine kasutatakse koekultuuritehnikates, farmakoloogilistes uuringutes ravimite metabolismi hindamiseks ja haiguste diagnostikas.
Mis vahe on kleepuvatel ja suspensioonrakuliinidel?
Kinduvad vs suspensioonrakuliinid |
|
| Kleepuvad rakuliinid on rakuliinid, mille esmased kultuurid on kinnitatud tahkele alusele. | Suspensioonrakuliinid on rakuliinid, mille kultuurid suspendeeritakse vedelas söötmes ja rakud jäävad seega vedelasse söötmesse. |
| Anchorage'i sõltuvus | |
| Kinduvad rakuliinid sõltuvad kinnituskohast. | Vestusrakuliinid on kinnituspunktist sõltumatud. |
| Agitatsioon | |
| Kinduvad rakuliinid ei vaja segamist. | Suspensioonirakuliinid nõuavad segamist. |
| Trüpsiniseerimine | |
| Trüpsinisatsioon esineb kleepunud rakuliinides. | Trüpsiniseerimine suspensiooni rakuliinides puudub. |
| Koekultuuriga töödeldud veresooned | |
| Nõutav kleepuvates rakuliinides. | Pole nõutav suspensiooni rakuliinides. |
| Tootlus | |
| Kinduvad rakuliinid annavad väiksema saagise. | Suspensioonrakuliinid annavad suurema saagise. |
Kokkuvõte – kleepuvad vs suspensioonrakuliinid
Rakuliinide säilitamine on oluline protsess nii loomsete rakukultuuride kui ka taimekoekultuuride rakukultuuris. Lisaks hoitakse rakuliine ka mikroobirakkude jaoks, mida kasutatakse laialdaselt tööstuslikes protsessides. Rakuliine võib nimetada kas kleepuvateks rakuliinideks või suspensioonrakuliinideks. Kleepuvad rakuliinid on saadud kleepunud primaarsetest rakukultuuridest ja need sõltuvad kinnituskohast. Suspensioonrakuliinid on saadud suspensiooni primaarsetest rakukultuuridest. Need rakud eksisteerivad vedelas keskkonnas ja rakkude kasvamiseks on vaja rakkude pidevat segamist. See on erinevus kleepuvate rakuliinide ja suspensioonrakuliinide vahel.
