Põhiline erinevus Valamisplaadi ja Puisteplaadi vahel on see, et teadaolev kogus proovi kantakse puisteplaadil agarisöötme pinnale, samas kui kallatusplaadil segatakse teadaolev kogus proovi agar ja seejärel valatakse taldrikule. Nende kahe tehnika täpsuse võrdlemisel on puistamisplaadil suurem täpsus kui laotatud plaadil.
Standardne plaatide loendusmeetod on kasvupõhine lähenemisviis, mis loendab proovis elavate (kasvavate/kultiveeritavate/elujõuliste) mikroorganismide arvu. See on võimas meetod, mida kasutatakse paljudes mikrobioloogilistes valdkondades elusate mikroorganismide arvu analüüsimiseks. Seda tehnikat kasutavad sellised valdkonnad nagu toit ja piimandus, meditsiin, keskkond, vesi ja põllumajandus, mikroobigeneetika, molekulaarmikrobioloogia, kasvusubstraadi arendamine ja biotehnoloogia (bioreaktoritehnoloogia, kääritamine, jäätme-/reoveepuhastus jne). Lisaks on standardse plaadiloenduse tegemiseks kaks peamist viisi: need on laialilaotamise tehnika ja plaadi valamise tehnika.
Mis on Valamisplaat?
Valamisplaadi tehnika on mikroobne meetod proovis sisalduvate elujõuliste rakkude loendamiseks. Valamisplaadi meetodi eripära seisneb selles, et teadaolev kogus proovi segatakse esm alt agariga ja seejärel valatakse plaadile.
Joonis 01: Vala plaat
Teised sammud on sarnased järgmises jaotises käsitletud laotatud plaadi tehnikaga. Järgmine samm pärast prooviga segatud agari valamist on lasta sellel tahkuda ja inkubeerida. Pärast inkubeerimist on 1 g või 1 ml lõpliku CFU arvutamiseks oluline arvestada elujõuliste kolooniate arvu.
Mis on Spread Plate?
Laotusplaat on meetod elujõuliste rakkude loendamiseks proovis. Selle tehnika puhul on proovi jaoks vajalik seerialahjendus, et vähem alt ühest kolooniast tekiks loetav arv kolooniaid. Protsess seisneb selles, et pipeteeritakse kindlaksmääratud kogus lahjendust agarplaadi pinnale ja jaotatakse see kiiresti ja ühtlaselt üle agari pinnale klaasist puisturiga, mis on alkoholiga leekitud ja jahutatud. Usaldusväärse keskmise väärtuse saamiseks on vajalik korduste tegemine. Järgmine samm on neid plaate lühiajaliselt kuivatada, seejärel pöörata ümber ja asetada inkubaatorisse kasvuks sobival temperatuuril ja määratud inkubatsiooniperioodiks.
Joonis 02: Laotav plaat
Pärast inkubeerimist näitab plaatide uurimine kasvu. Ühe või mitme lahjenduse korral tekitab inokulantides sisalduvate rakkude arv (nt 100 või 200 μl) agari pinnal 30 kuni 300 eraldiseisvat kolooniat. Vähem kui 30 kolooniate arv on statistiliselt ebausaldusväärne. Arve üle 300 on raske loendada ja need võivad eksida.
Millised on kallatusplaadi ja katteplaadi sarnasused?
- Laotusplaat ja kallatusplaat on kaks meetodit proovis olevate elujõuliste rakkude arvu saamiseks.
- Mõlemad on otsesed meetodid.
- Samplivõtu vead võivad esineda mõlema meetodi puhul.
- Kasvutingimuste piirangud mõjutavad mõlema meetodi tulemust.
- Tehnilised vead võivad samuti häirida mõlema meetodi lõpptulemust.
- Kuigi need kaks meetodit on elujõulised, ei kasutata neid kasvatamatute bakterite kasvatamiseks.
Mis vahe on valuplaadil ja katteplaadil?
Valamisplaat on mikroobne meetod proovis olevate elujõuliste rakkude loendamiseks. Spread plate tehnika on teine meetod söötme pinnal kasvanud bakterite loendamiseks. Valamisplaadi tehnikas lisatakse proov valuplaadi tahkestunud söötme pinnale. Kuid spred-plaadi tehnikas segatakse proov sulaagariga ja seejärel valatakse see plaadile.
Nende kahe tehnika täpsust silmas pidades on valamisplaadil suurem täpsus kui laotatud plaadil. Veelgi enam, erinev alt valamisplaadist kasutatakse proovi ühtlaseks jaotamiseks laotatud plaadil olevale pinnale klaasipuistat. Lisaks on valuplaadi abil võimalik loetleda aeroobid, anaeroobid ja fakultatiivsed anaeroobid. Puisteplaadi abil on aga võimalik ainult aeroobid loetleda. Peale selle on laotamise plaadi tegemiseks vajalikud tahkestatud agarplaadid, samas kui valamismeetodi jaoks on vaja vedelat sula agarit.
Kokkuvõte – valamisplaat vs laotamisplaat
Valamisplaat ja puistamisplaat on mikrobioloogias kaks tehnikat, mis hõlbustavad mikroobirakkude loendamist proovis. Mõlemad meetodid põhinevad kasvul, seega mõõtke elujõulisi rakke. Valamisplaadi ajal segatakse teadaolev kogus proovi sulaagariga ja valatakse plaadile. Laotamisplaadi ajal levib tahkestatud agarsöötme pinnale teadaolev kogus. See on kallatusplaadi ja laotamisplaadi erinevus.
