Põhiline erinevus CHO-S ja CHO-K1 vahel on viis, kuidas rakud paljunevad ja kasvavad. Kui CHO-S on kohandatud kasvama suspensiooni vedelkultuurides, siis CHO-K1 on rakuliin, mida saab geneetiliselt manipuleerida, et kasvada suspensioonirakkude või kleepuvate rakkudena.
CHO tähistab hiina hamstri munasarja rakke. See on epiteeli rakuliin. See epiteeli rakuliin on pärit hiina hamstri munasarjast. CHO-d kasutatakse meditsiinilistes ja bioloogilistes uuringutes. Seda kasutatakse laialdaselt ka kaubanduslikult saadavate terapeutiliste rekombinantsete valkude tootmisel. Teaduslikud uuringud, milles kasutatakse CHO-st ja CHO-st pärinevaid rakuliine, hõlmavad toksilisuse skriinimise, geneetiliste uuringute, toitumise ja rekombinantsete valkude ekspressiooniga seotud geeniekspressiooni uuringuid.
Mis on CHO-S?
CHO-S on CHO rakuliinist tuletatud rakuliini tüüp. CHO-S rakkude tähtsus teadusuuringutes on rakuliini kohandamine seerumivabas suspensioonikultuuris, et kasvada kõrge rakutihedusega. Seega on CHO-S rakuliin ideaalne suuremahuliste tööstuslike bioreaktorite kasvatamiseks. Need on olulised valgu ekspressiooniprotsessis biotootmises. CHO-S rakuliini kasv seerumivabas suspensioonis sõltub mitmest tegurist. Need on söötme koostis, rakkude õige hooldus ja rakukultuuri formaat. Praegu kasutavad CHO-S rakud kasvu jaoks kaasaegseid söötmepreparaate. Nende hulka kuuluvad Mirus Bio ja CHOgro® Expression Medium. Need söötmed võimaldavad CHO-S rakkudel saavutada rakkude tiheduse 1-2 × 107 rakku/ml. Lisaks ül altoodud söötmetüüpidele soovitatakse kasvu CHO-S rakkude jaoks ka mõnda muud tüüpi söödet, sealhulgas Hamsi F10, Ham F12, ProCHO ja PowerCHO™.
Joonis 01: CHO
Seda tüüpi söötmete kasutamise ainsaks puuduseks on see, et CHO-S-rakud tarbivad kiiresti söötmes olevaid toitaineid. Seega, et ületada see rakkude säilitamise väljakutse, tuleks suspensiooni jagada, et vähendada rakutihedust ja anda regulaarselt värsket kasvukeskkonda.
Mis on CHO-K1?
CHO-K1 on rakuliin, mis on tuletatud CHO rakuliinist täiskasvanud hiina hamstri munasarjast pärineva vanemliku CHO rakuliini subkloonina. CHO-K1 rakkude kasvatamisel on oluline anda kasvusöötmele lisandina proliini. See on tingitud asjaolust, et CHO-K1 rakkudel puudub proliini biosünteesiks vajalik kromosoom. Selle tulemuseks on biosünteetilise ahela blokeerimine glutamiinhappe muundamisel gamma-glutamiini seri-aldehüüdiks.
CHO-K1 rakke kasutatakse laialdaselt toitumis- ja geeniekspressiooniuuringutes, rakukultuuris, kasvutingimustes, stabiilses rakutransfektsioonis, mööduvas transfektsioonis ja valguekspressioonis. CHO-K1 rakud kasvavad pärast geneetilist manipuleerimist suspensioonrakkudena või adherentsete rakkudena. Seetõttu kasutatakse CHO-K1 rakke laialdaselt terapeutilistes rekombinantsete valkude tootmises ja munasarjavähiga seotud in vitro vähiuuringutes. CHO-K1 rakud näitavad viirusetundlikkust ja resistentsust polioviiruse suhtes. CHO-K1 rakud toimivad ka kasvufaktorite, monoklonaalsete antikehade, interferoonide ja ensüümide ekspressioonisüsteemina. CHO-K1 rakkude roll nendes aspektides on domineeriv.
Millised on CHO-S ja CHO-K1 sarnasused?
- CHO-S ja CHO-K1 on kaks rakuliini, mis pärinevad hiina hamstri munasarjade epiteelirakkudest.
- Mõlemat tüüpi kasvatatakse suspensioonisöötmes.
- Neid tüüpe kasutatakse bioloogilistes ja meditsiinilistes uuringutes.
- Lisaks kasutatakse nii CHO-S-i kui ka CHO-K1-d paljudes müügilolevates raviuuringutes.
Mis vahe on CHO-S ja CHO-K1 vahel?
Põhiline erinevus CHO-S ja CHO-K1 vahel on see, et CHO-S kasvab ainult suspensioonrakkudena, kuid CHO-K1 kasvab nii suspensiooni kui ka kleepunud rakkudena. Nii CHO-S kui ka CHO-K1 pärinevad samast esivanemate CHO-st, kuid neil on rakenduste osas erinevusi. Erinev alt CHO-K1-st puudub CHO-K1 proliini sünteesiv geen. Seetõttu lisatakse kultiveerimisel söötmesse proliini.
Allpool olev infograafik esitab tabelina erinevused CHO-S ja CHO-K1 vahel, et neid kõrvuti võrrelda.
Kokkuvõte – CHO-S vs CHO-K1
CHO-S ja CHO-K1 rakuliinid on saadud Hiina hamstri munasarja (CHO) epiteelirakkudest. Mõlemad tüübid on olulised erinevate, nii meditsiiniliste kui ka bioloogiliste uuringute jaoks. CHO-S on suspensioonrakuliin, samas kui CHO-K1 on kas suspensioon või adherentne rakuliin. CHO-K1 oluline omadus on see, et sellel puudub proliini sünteesiv geen. CHO-S-i kasutatakse laialdaselt tööstuslikes bioreaktorisüsteemides. CHO-K1 rakendused seisnevad rohkem geeniekspressiooniuuringutes. See võtab kokku erinevuse CHO-S ja CHO-K1 vahel.
