Põhiline erinevus RIA ja ELISA vahel seisneb selles, et radioimmunoanalüüs (RIA) on immunotesti meetod, mis kasutab radioisotoope antigeeni-antikeha komplekside tuvastamiseks, samas kui ensüümiga seotud immunosorbentanalüüs (ELISA) on immuunanalüüsi meetod, mis kasutab antigeeni tuvastamiseks ensüüme. -antikehade kompleksid.
Spetsiifiliste valkude, näiteks antigeenide tuvastamine on haiguste diagnoosimisel äärmiselt oluline. Seetõttu on RIA ja ELISA kaks immunoanalüüsi meetodit, mida laborites kasutatakse spetsiifiliste valkude, eriti antigeenide kiireks tuvastamiseks. Üldiselt seondub spetsiifiline antikeha sihtantigeeniga ja moodustab nähtava kompleksi, mida tuntakse sademe nime all. Neid antikehade ja antigeenide komplekse saab tuvastada erinevate tehnikate abil. Antigeen-antikeha kompleksi tuvastamise tehnikat radioisotoopide abil tuntakse RIA-na ja antigeeni-antikeha kompleksi tuvastamise tehnikat ensüümide abil nimetatakse ELISA-ks.
Mis on RIA?
Radioimmunoanalüüs (RIA) on immuunanalüüsi tehnika, mis tuvastab radioisotoope kasutades antigeeni ja antikeha komplekse. Rosalyn Sussman Yalow töötas selle tehnika välja 1960. aastal Solomon Bersoni abiga. Selle tähelepanuväärse avastuse eest võitis Rosalyn Sussman Yalow 1977. aastal Nobeli meditsiinipreemia. Tavaliselt muudetakse radioimmuunanalüüsis teadaolev kogus antigeeni esm alt radioaktiivseks. See meetod kasutab märgistamiseks sageli joodi gamma-radioaktiivseid isotoope, mida nimetatakse 125-I. antigeenid. Need radioisotoobid kinnituvad tavaliselt antigeeni türosiini aminohappe külge. Seejärel segatakse radiomärgistatud antigeen antikehaga. Selle tulemusena seonduvad radioaktiivselt märgistatud antigeen ja antikeha üksteisega spetsiifiliselt.
Hiljem lisatakse seerumiproov, mis sisaldab teadmata koguses sama antigeeni. See põhjustab seerumi märgistamata antigeeni konkureerimise radiomärgistatud antigeeniga antikeha sidumissaitide pärast. Märgistamata antigeeni kontsentratsiooni suurenedes seondub suurem osa sellest antikehaga, tõrjudes välja radiomärgistatud variandi. Seega vähendab see antikehaga seotud radiomärgistatud antigeeni ja vaba radiomärgistatud antigeeni suhet. Protseduuri lõpus eraldatakse seotud antigeenid. Lõppkokkuvõttes mõõdetakse vabade antigeenide radioaktiivsust järelejäänud supernatandis gamma-loenduriga.
Mis on ELISA?
ELISA on immuunanalüüsi meetod, mis tuvastab ensüümide abil antigeeni ja antikeha kompleksid. See on biokeemiline analüütiline analüüs, mida kirjeldasid esmakordselt Engvall ja Perlmann 1971. aastal. Enamiku lihtsate ELISA meetodite puhul kinnitatakse patsiendi proovi antigeenid tahkele pinnale. Seejärel kantakse pinnale sobiv antikeha, et see saaks antigeeniga seonduda.
Joonis 01: ELISA
See konkreetne antikeha on seotud ensüümiga. Hiljem eemaldatakse kõik seondumata antikehad pesuvahendiga pestes. Selle tehnika viimases etapis lisatakse ensüümi substraat. Kui antigeen ja antikeha seonduvad korralikult, tekitab järgnev reaktsioon tuvastatava värvisignaali, kõige sagedamini värvimuutuse.
Millised on RIA ja ELISA sarnasused?
- RIA ja ELISA on immuunanalüüsi tehnikad.
- Mõlemal tehnikal on antigeeni ja antikeha kompleksi moodustumine.
- Neid meetodeid saab kasutada proovides tundmatute valkude tuvastamiseks.
- Neid mõlemaid kasutatakse haiguste diagnoosimisel laborites.
- Mõlemad on väga spetsiifilised ja tundlikud tehnikad.
Mis vahe on RIA ja ELISA vahel?
RIA on immunoanalüüsi meetod antigeen-antikeha kompleksi tuvastamiseks radioisotoopide abil. ELISA on immuunanalüüsi meetod antigeen-antikeha kompleksi tuvastamiseks ensüümide abil. Niisiis, see on peamine erinevus RIA ja ELISA vahel. Veelgi enam, RIA tehnikas märgistatakse antigeen, kuid ELISA puhul märgistatakse antikeha. Lisaks on RIA tehnikas märgistavad molekulid radioisotoobid, samas kui ELISA puhul on märgistavad molekulid ensüümid. Seega on see veel üks erinevus RIA ja ELISA vahel.
Allpool olev infograafik näitab rohkem erinevusi RIA ja ELISA vahel tabeli kujul.
Kokkuvõte – RIA vs ELISA
Immuunanalüüsid mängivad väga olulist rolli erinevates bioanalüütilistes seadetes, nagu kliiniline diagnostika, biofarmatseutiline analüüs, keskkonnaseire, bioohutus ja toidutestid. Alates 1960. aastatest on välja töötatud lai valik immuunanalüüse. RIA ja ELISA on mõlemad immuunanalüüsi meetodid. RIA on immunoanalüüsi meetod antigeeni-antikeha kompleksi tuvastamiseks radioisotoopide abil. ELISA on immuunanalüüsi meetod antigeeni-antikeha kompleksi tuvastamiseks ensüümide abil. Seega on see kokkuvõte erinevusest RIA ja ELISA vahel.
