Põhierinevus Elisa ja Western blot analüüsi vahel on see, et Elisa ehk ensüümiga seotud immuunanalüüs on diagnostiline tööriist, mis tuvastab, kas patsient on kokku puutunud teatud tüüpi viirusega või mõne muu nakkustekitajaga, samas kui Western blot on meetod, tuvastab valguproovist konkreetse valgu.
AIDS on muutunud ülemaailmseks probleemiks ja selle surmava haiguse esinemissagedus on viimastel aastakümnetel murettekitav alt suurenenud. HIV-testid tuvastavad seda sündroomi põhjustava inimese immuunpuudulikkuse viiruse (HIV) olemasolu. Erinevatest HIV-testidest on tänapäeval väga populaarsed ELISA ja Western Blot. ELISA tähistab ensüümiga seotud immunosorbentanalüüsi, mis on plaadipõhine analüüsimeetod.. See on ensüümi immuunanalüüs, mida kasutatakse HIV-antikehade tuvastamiseks. Western blot tuvastab valgusegust spetsiifilise valgu, kasutades märgistatud antikeha.
Põhierinevus
1. Ülevaade ja peamised erinevused
2. Mis on Elisa
3. Mis on Western Blot
4. Elisa ja Western Bloti sarnasused
5. Kõrvuti võrdlus – Elisa vs Western Blot tabelikujul
6. Kokkuvõte
Mis on Elisa?
ELISA, mis tähistab ensüümiga seotud immunosorbentanalüüsi, oli esimene test, mis oli mõeldud peamiselt HIV tuvastamiseks. See on plaadipõhine analüüs. Seda kasutatakse HIV-antikehade tuvastamiseks ja see test näitab kõrget tundlikkust. Selle tehnika puhul seonduvad proovis olevad antigeenid immobiliseeritud antikehadega tahkel pinnal. Pärast immobiliseerimist moodustavad antigeenid komplekse ensüümidega seotud antikehadega. Seejärel inkubeeritakse need konjugeeritud ensüümid vastava substraadiga.
Joonis 01: ELISA
Ensüüm-substraadi reaktsioon annab mõõdetava värvilise saaduse. Mõõtes toote kogust, saab kvantifitseerida proovis sisalduvate antigeenide arvu. Seetõttu on ELISA väga spetsiifiline ja keerukas tehnika, mis nõuab hästi kvalifitseeritud tehnikute tähelepanu. See on ka aeganõudev protsess, mille jaoks on vaja täiustatud seadmeid.
Mis on Western Blot?
Western blotting on meetod, mis võimaldab tuvastada valgusegust spetsiifilist valku. Western blot on membraan, mida kasutatakse blotanalüüsi käigus SDS-polüakrüülamiidgeeli valgumustrite peegelpildi saamiseks. Western blot analüüsiks kasutatav membraan koosneb enamasti nitrotselluloosist või polüvinülideendifluoriidist (PVDF). Ülekantud valguga membraani saab kasutada konkreetse valgu tuvastamiseks. Soovitud valgu tuvastamiseks hübridisatsiooni teel on vaja kvaliteetset antikeha. Antikeha seondub oma spetsiifilise antigeeniga ja näitab soovitud antigeeni, milleks on valk, olemasolu.
Joonis 02: Western Blot
Valkude ülekandmine SDS-i polüakrüülamiidgeelist Western blot-analüüsi teostatakse elektroblotanalüüsiga. See on tõhus ja kiire meetod, mis põhjustab valkude elektroforeesimise geelist ja kandumise nitrotselluloosmembraanile (Western blot).
Western blotting on kasulik HIV-vastaste antikehade tuvastamiseks inimese seerumiproovis. Western blot'i saab kasutada ka B-hepatiidi nakkuse kinnitava testina ja hullu lehma tõve lõpliku testina.
Millised on Elisa ja Western Bloti sarnasused?
- Elisa ja Western blot on kahte tüüpi HIV-i diagnoosimiseks kasutatavaid tehnikaid.
- Mõlemad meetodid põhinevad immuuntuvastusel.
- Need põhinevad antikeha-valgu kompleksi moodustumisel.
- Mõlemad meetodid võivad analüüsida valke.
- Elisa ja Western blotting on aeganõudvad tehnikad.
- Nende tehnikate kasutamiseks on vaja hästi koolitatud ja kvalifitseeritud töötajaid.
Mis vahe on Elisal ja Western Blotil?
ELISA on väga tundlik ja väga keerukas meetod, mis tuvastab antigeeni ja antikeha olemasolu patsiendi veres, samas kui Western blot on meetod, mis tuvastab valgusegust spetsiifilise valgu. See on peamine erinevus Elisa ja Western bloti vahel. Elisa on nii kvalitatiivne kui ka kvantitatiivne. Seevastu Western blot on kvalitatiivne. Mõnikord on see poolkvantitatiivne. Arvestades testile kuluvat aega, on Elisa test aeganõudev, samas kui Western blot on aeganõudvam kui Elisa.
Allpool olev infograafik võtab kokku Elisa ja Western bloti erinevuse.
Kokkuvõte – Elisa vs Western Blot
ELISA on väga tundlik ja väga keerukas meetod, mis tuvastab antigeeni ja antikeha olemasolu meie veres. Teisest küljest töötatakse välja Western blot meetod, et tuvastada valgu segust spetsiifiline valk. See on peamine erinevus Elisa ja Western bloti vahel. ELISA oli esimene HIV avastamiseks mõeldud test. ELISA testi tulemuste kinnitamiseks võib kasutada Western Blot'i. Nii ELISA-d kui ka Western Blot'i peetakse HIV tuvastamise kaudseteks meetoditeks.
