Põhiline erinevus diferentsiaal- ja tihedusgradienttsentrifuugimise vahel seisneb selles, et diferentsia altsentrifuugimine eraldab segus olevad osakesed osakeste suuruse alusel, samas kui tihedusgradienttsentrifuugimisel eraldatakse osakesed segus osakeste tiheduse alusel.
Tsentrifuugimine on analüüdi segu erinevate komponentide eraldamise meetod. See meetod hõlmab proovi pööramist ümber fikseeritud telje, mis põhjustab tsentrifugaaljõu teket. Tsentrifugaaljõud paneb proovis olevad osakesed läbi vedela keskkonna allapoole liikuma. See protsess põhjustab erineva suuruse ja tihedusega osakeste või rakkude settimist erineva kiirusega.
Mis on diferentsia altsentrifuugimine?
Diferentsia altsentrifuugimine on analüütiline tehnika, mille abil saame osakesi eraldada segus sõltuv alt osakese suurusest. See on lihtsaim tsentrifuugimise vorm ja seda nimetatakse ka diferentsiaalseks granuleerimiseks. See meetod on oluline komponentide eraldamisel rakus. Erineva suurusega osakesed settivad tsentrifuugimisel erineva kiirusega. Teisisõnu, suured osakesed settivad kiiremini kui väiksemad osakesed. Lisaks saab settimiskiirust suurendada tsentrifugaaljõu suurendamisega.
Selle rakendusi kaaludes on diferentsia altsentrifuugimine kasulik rakkude kogumisel või koehomogenaadist subtsellulaarsete toorfraktsioonide tootmisel. Nt. maksa homogenaat sisaldab tuumasid, mitokondreid, lüsosoome ja membraani vesiikuleid. Kui me tsentrifuugime seda homogenaati väikese kiirusega ja lühikest aega, saame pelletiks suured tuumad. Kui kasutame suurt tsentrifugaaljõudu, saame pelletisse mitokondrid. Siiski on bioloogilised proovid alati saastunud.
Mis on tihedusgradienttsentrifuugimine?
Tihedusgradienttsentrifuugimine on analüütiline tehnika, mille abil saame eraldada osakesi analüüdi segus osakeste tiheduse alusel. Selle meetodi puhul kontsentreeritakse ained tseesiumisoolade lahuses või sahharoosis. Meetod hõlmab osakeste fraktsioneerimist ujuvuse tiheduse alusel. Selle meetodi tihedusgradiendiks on tseesiumisool või sahharoosikeskkond. On kahte tüüpi tihedusgradienttsentrifuugimist: kiirustsooni tsentrifuugimine ja isopükniline tsentrifuugimine.
Kiirustsooniline tsentrifuugimine hõlmab eralduskeskkonda, millel on kihiline struktuur kitsa tsooniga tihedusgradiendi kohal. Selles protsessis kipuvad osakesed tsentrifugaaljõu mõjul liikuma erineva kiirusega, olenev alt osakeste tihedusest. Tavaliselt toodavad kõik osakesed graanuleid, kuna osakeste tihedus on suurem kui tiheduse gradient.
Isopükniline tsentrifuugimine on teist tüüpi tihedusgradienttsentrifuugimise meetod. See algab homogeense lahusega. Tsentrifugaaljõu mõjul liiguvad osakesed analüüdi segus, kuni osakeste tihedus on sarnane tihedusgradiendiga. Seetõttu võime seda tehnikat nimetada ka tasakaalutsentrifuugimiseks.
Mis vahe on diferentsiaal- ja tihedusgradienttsentrifuugimisel?
Diferentsiaal- ja tihedusgradienttsentrifuugimine on kahte tüüpi tsentrifuugimisprotsesse, mis on seotud analüüdi segu komponentide eraldamisega. Peamine erinevus diferentsiaal- ja tihedusgradienttsentrifuugimise vahel seisneb selles, et diferentsia altsentrifuugimine eraldab segus olevad osakesed osakeste suuruse alusel, samas kui tihedusgradienttsentrifuugimisel eraldatakse osakesed segus osakeste tiheduse alusel.
All infograafika sisaldab rohkem erinevusi diferentsiaal- ja tihedusgradienttsentrifuugimise vahel.
Kokkuvõte – diferentsiaal- ja tihedusgradienttsentrifuugimine
Diferentsiaal- ja tihedusgradienttsentrifuugimine on kahte tüüpi tsentrifuugimisprotsesse, mis on seotud analüüdi segu komponentide eraldamisega. Peamine erinevus diferentsiaal- ja tihedusgradienttsentrifuugimise vahel seisneb selles, et diferentsia altsentrifuugimine eraldab segus olevad osakesed osakeste suuruse alusel, samas kui tihedusgradienttsentrifuugimisel eraldatakse osakesed segus osakeste tiheduse alusel.
