Põhierinevus fikseerimise ja stabiliseerimise vahel on see, et fikseerimine hõlmab fikseerimisreagendi kiiret tungimist kudedesse ja kudede fikseerimist olemasoleva biomolekulaarse struktuuriga, samas kui stabiliseerimisprotsess hõlmab fikseerimisprotsessi lõpetamist ja biomolekulide optimaalset kaitsmist pikka aega periood.
Fikseerimine ja stabiliseerimine on biokeemias väga olulised protsessid kudede säilitamise ja kultiveerimise jaoks.
Mis on fikseerimine?
Fikseerimine on analüütiline protsess, mille käigus rakkude ja kudede koostisosad fikseeritakse füüsikalises ja osaliselt keemilises olekus, et panna need vastu pidama järgnevatele töötlustele, sealhulgas erinevatele reaktiividele. Selle protsessi käigus on reaktiivide kadu minimaalne ning esineb olulisi moonutusi või lagunemist.
Kui kude kehast eemaldatakse, kipub see läbima enesehävitusprotsessi, mida nimetatakse autolüüsiks. Seega, kui jätame selle koe ilma igasuguse säilitusaineta, võib toimuda bakterite rünnak (seda nimetatakse mädanemiseks). Nende protsesside vältimiseks on vajalik koeproovide säilitamine ja kõvenemine, tagades, et eluskudede tekstuur säiliks võimalikult peaaegu sama.
See meetod on oluline autolüüsi ja mädanemise vältimiseks, oluline kiireks ja ühtlaseks tungimiseks, rakkude ja kudede võimalikult elavaks säilitamiseks, labiilsete elementide stabiliseerimiseks jne.
Joonis 01: kudede säilitamine
Fikseerimiseks on erinevaid meetodeid. See hõlmab kuumtöötlust, kemikaalide (nt koagulandid jne) kasutamist. Kõige tavalisemad keemilised fikseerijad saame liigitada mitmesse rühma: aldehüüdid, oksüdeerivad ained, valke denatureerivad ained, ristsiduvad ained ja mitmesugused.
Lisaks on fikseerimist mõjutavad erinevad tegurid, nagu vesinikioonide kontsentratsioon, temperatuur, penetratsioon, osmolaalsus ja kontsentratsiooni kestus.
Mis on stabiliseerimine?
Stabiliseerimine on analüütiline protsess, mis on kasulik fikseerimisprotsessi peatamiseks ja biomolekulide optimaalseks kaitsmiseks pikaajaliseks säilitamiseks. Seetõttu toimub see protsess pärast fikseerimisetappi. Stabilisaatoritega, nagu PAXgene Tissue Stabilizer, saame oma koeproovi toatemperatuuril kaitsta umbes 7 päeva ja väga madalatel temperatuuridel hoida neid kuni 4 nädalat. Kui temperatuur läheb miinusesse, siis suudame kudesid säilitada isegi mitu aastat.
DNA< RNA ja valkude in vivo profiili säilitamiseks on oluline ka kudede vahetu stabiliseerimine. Enamik praegu kasutatavatest stabilisaatoritest on formaliinivabad säilitusained, mis annavad fikseeritud kudedest paremad molekulaarsed tulemused.
Mis vahe on fikseerimisel ja stabiliseerimisel?
Fikseerimine ja stabiliseerimine on olulised analüüsimeetodid. Peamine erinevus fikseerimise ja stabiliseerimise vahel on see, et fikseerimine hõlmab fikseerimisreagendi kiiret tungimist kudedesse ja kudede fikseerimist olemasoleva biomolekulaarse struktuuriga, samas kui stabiliseerimisprotsess hõlmab fikseerimisprotsessi lõpetamist ja biomolekulide optimaalset kaitsmist pika aja jooksul. Lisaks hõlmab fikseerimine kuumtöötlemismeetodeid ja keemilisi meetodeid (nt koaguleerivad ja mittekoaguleerivad kemikaalid), samas kui stabiliseerimine hõlmab külmutamist madalatel temperatuuridel.
Järgmine on fikseerimise ja stabiliseerimise erinevuste kokkuvõte tabeli kujul.
Kokkuvõte – fikseerimine vs stabiliseerimine
Fikseerimine ja stabiliseerimine on biokeemias väga olulised protsessid kudede säilitamise ja kultiveerimise nõuete jaoks. Peamine erinevus fikseerimise ja stabiliseerimise vahel on see, et fikseerimine hõlmab fikseerimisreagendi kiiret tungimist kudedesse ja kudede fikseerimist olemasoleva biomolekulaarse struktuuriga, samas kui stabiliseerimisprotsess hõlmab fikseerimisprotsessi lõpetamist ja biomolekulide optimaalset kaitsmist pika aja jooksul.
