Põhierinevus Bradfordi ja Lowry valgutesti vahel on see, et Bradfordi valguanalüüs põhineb värvaine Coomassie briljantsinise G-250 neeldumise nihkel, samas kui Lowry valgutest põhineb vaseoonide (Cu+) ioonide reaktsioonil. toodetud peptiidsidemete oksüdeerimisel Folin-Cioc alteu reagendiga.
Analüüs on analüütiline meetod, mis aitab iseloomustada proovi peamisi funktsionaalseid komponente. Seega võib analüüs olla kas kvalitatiivne või kvantitatiivne test. Paljud valdkonnad, sealhulgas laborimeditsiin, farmakoloogia, keskkonnabioloogia, molekulaarbioloogia, biokeemia ja immunoloogia, kasutavad seda tüüpi analüüse rutiinselt. Bradfordi ja Lowry valguanalüüs on kaks biokeemilist analüüsi, mis määravad valgu kontsentratsiooni proovilahuses. Mõlemas testis kasutatakse tulemuste saamiseks kolorimeetrilisi meetodeid.
Mis on Bradfordi valguanalüüs?
Bradfordi valguanalüüs on valguanalüüsi kiire spektroskoopiline analüütiline protseduur. See näitab valgu kontsentratsiooni mõõtmisel lahuses suurt täpsust. Marion Bradford tutvustas seda protseduuri 1976. aastal. Selles analüüsis põhineb kogu reaktsioon mõõdetud valkude aminohappelisel koostisel. Teisisõnu on Bradfordi valguanalüüs kolorimeetriline analüüs. See kasutab värvainet Coomassie briljantsinine. Seega sõltub see kolorimeetriline valguanalüüs värvaine neeldumise nihkest. Coomassie briljantsinine G-250 on saadaval kolmes vormingus: katioonne (punane), anioonne (sinine) ja neutraalne (roheline). Happelistes tingimustes muutub värvaine punane vorm siniseks. See kinnitab valgu seondumist. Kui valku pole, võib lahus jääda pruuniks.
Joonis 01: Bradfordi valguanalüüs
Bradfordi valguanalüüs erineb teistest valgutestidest, kuna see on vähem vastuvõtlik valgulahuses sisalduvate erinevate keemiliste ühendite mõjudele. Nende ühendite hulka kuuluvad naatrium, kaalium, glükoos ja sahharoos jne.
Mis on Lowry valguanalüüs?
Lowry valgu test on biokeemiline test, mida kasutatakse valgu üldtaseme määramiseks lahuses. Oliver H. Lowry töötas selle reaktiivi välja 1940. aastal. Protseduur kujutab lahuse valgu kogukontsentratsiooni värvimuutusega, mis on võrdeline valgu kontsentratsiooniga lahuses. Seega on see ka kolorimeetriline valguanalüüs.
Selle protseduuri aluseks on reaktsioon peptiidsidemete oksüdatsioonil tekkivate vase ioonide (Cu+) ja Folin-Cioc alteu reagendi vahel. Samuti sisaldab see reaktiiv fosfomolübdeenhapet ja fosfor-volframhapet. Siiski ei ole Lowry valguanalüüsi reaktsioonimehhanism hästi teada. Kuid see hõlmab tsüsteiini, trüptofaani ja türosiini jääkide oksüdeerimist Folin-Cioc alteu reagendi redutseerimise teel.
Joonis 02: Lowry valgu test
Tsüsteiinijäägid aitavad kaasa Lowry valgu testis täheldatud neeldumisele ja reaktsiooni tulemuseks on hiilgav sinine molekul; heteropolübdeensinine. Selle molekuli redutseerimist mõõdetakse neeldumise järgi 660 nm juures. Seega tuletab Folin-Cioc alteu reaktiivi redutseerinud tsüsteiini ja trüptofaani jääkide kontsentratsioon valgu kogukontsentratsiooni lahuses.
Millised on Bradfordi ja Lowry valguanalüüsi sarnasused?
- Bradfordi ja Lowry valgutestid määravad valgu kontsentratsiooni lahuses.
- Mõlemad meetodid on kolorimeetrilised meetodid.
- Samuti on mõlema meetodi tundlikkus kõrge.
Mis vahe on Bradfordi ja Lowry valguanalüüsi vahel?
Bradfordi ja Lowry valguanalüüs on kahte tüüpi analüüsid, mis määravad valgu kontsentratsiooni lahuses. Bradfordi valgu test põhineb värvaine Coomassie briljantsinise G-250 neeldumise nihkel, samas kui Lowry valgu test sõltub peptiidsidemete oksüdatsioonil tekkivate vase ioonide reaktsioonist Folin-Cioc alteu reagendiga. Niisiis, see on peamine erinevus Bradfordi ja Lowry valguanalüüsi vahel. Bradfordi valguanalüüsil kulub tulemuse saamiseks 15 minutit, Lowery valguanalüüsil aga 40–60 minutit. Seega on see veel üks erinevus Bradfordi ja Lowry valguanalüüsi vahel. Lisaks sõltub Bradfordi valgu test aminohapete koostisest, samas kui Lowry valgu test sõltub osaliselt aminohapete koostisest. Seega on see ka erinevus Bradfordi ja Lowry valguanalüüsi vahel.
Altpoolt infot leiate Bradfordi ja Lowry valguanalüüsi erinevuste kohta.
Kokkuvõte – Bradford vs Lowry valguanalüüs
Analüüs on analüütiline meetod, mida kasutatakse proovi peamise funktsionaalse komponendi iseloomustamiseks. Bradfordi ja Lowry valguanalüüs on kahte tüüpi valguanalüüsid, mis toimivad kolorimeetriliste meetoditega. Nii Bradfordi kui ka Lowry valguanalüüsid määravad valgu kontsentratsiooni lahuses. Peamine erinevus Bradfordi ja Lowry Protein Assay vahel seisneb aga nende kasutatavas kolorimeetrilises tehnikas. Bradfordi valguanalüüsis kasutatakse Coomassie briljantsinist G-250, Lowry valguanalüüsis aga vaseoonide (Cu+) ioone ja Folin-Cioc alteu reaktiivi. Lisaks annab Bradfordi meetod kiiremaid tulemusi kui Lowry valguanalüüs. Mõlemad meetodid on aga väga tundlikud meetodid ja neid mõjutavad erinevad ained.
