Põhiline erinevus kromosoomiribade ja kromosoomide värvimise vahel seisneb selles, et kromosoomitriibutamine on värvimistehnika, mis kuvab kromosoomide piirkondi eristatavate tumedate ja heledate ribadena, kuid kromosoomivärvimine on hübridiseerimistehnika, mille käigus määratakse kromosoomide kindlad piirkonnad või segmendid. maalitud järjestusspetsiifiliste fluorestsentsmärgistatud sondidega.
Tsütogeneetikas on kromosoomide ja nende kõrvalekallete tuvastamiseks vaja toota organismi nähtavat karüotüüpi. Kromosoomide ribastamine ja kromosoomide värvimine on kaks tsütogeneetilist tehnikat, mis aitavad kromosoome visualiseerida. Mõlemad meetodid on kasulikud geneetiliste häirete tuvastamisel.
Mis on kromosoomiriba?
Kromosoomiriba on värvimistehnika, mis kuvab kromosoomi pikkuses vaheldumisi heledaid ja tumedaid ribasid või piirkondi. Riba viitab kromosoomi osale, mis on selgelt eristatav selle külgnevatest segmentidest tumedama või heledama välimusega. Tumedate ja heledate ribade tekitamiseks on vaja kromosoomid värvida sobiva värvainega, nagu fluorestsentsvärv kvinakriin või Giemsa peits.
On olemas mitut tüüpi kromosoomiribade määramise tehnikaid. Nende hulgas on Q-riba, vastupidine (R) riba ja G-riba üldistatud ribade määramise tehnikad. G-ribade tehnikas kasutatakse peitsi, mida nimetatakse Giemsa plekiks, ja see värvib heterokromaatiliste piirkondade AT-rikkaid piirkondi tumed alt värvitud ribades ja GC-rikkaid eukromaatilisi piirkondi kergelt värvunud ribades. R-riba on vastupidine G-ribale ja see värvib GC-rikkaid piirkondi tumedatesse ribadesse ja AT-rikkaid piirkondi heledatesse ribadesse. Q-riba seevastu kasutab fluorestsentsvärvi kinakriini ja see värvib kromosoome erineva intensiivsusega kollase fluorestsentsiga. C-ribade tehnika on veel üks vöötmistehnika, mis värvib tsentromeeri piirkondi. Lisaks visualiseerib T-riba tehnika telomeeride piirkondi.
Joonis 01: kromosoomiribad
Vöötmuster on organismidele ainulaadne. Seetõttu on need ainulaadsed vöötmismustrid olulised kromosoomide tuvastamisel ja kromosoomide aberratsioonide (kromosoomide katkemine, kadu, dubleerimine, translokatsioon või ümberpööratud segmendid) tuvastamisel.
Mis on kromosoomimaaling?
Kromosoomivärvimine on tehnika, mille käigus värvitakse kromosoomide teatud piirkonnad või segmendid järjestusespetsiifiliste sondide abil, mis on fluorestsentsmärgisega. Seetõttu on kromosomaalne värvimine alati seotud in situ FISH tehnikaga. See põhineb täielikult molekulaarsel hübridisatsioonil kromosoomide järjestusspetsiifiliste sondidega. Seetõttu vajab see sihtkromosoomide või kromosoomipiirkondade hübridiseerimiseks spetsiifilisi sonde.
Joonis 02: Kromosomaalne maalimine
Lisaks nõuab see meetod esialgu metafaasis oleva sihtkromosomaalse DNA denatureerimist. Teiseks toimub hübridisatsioonietapp sondide abil. Kui sondid leiavad oma komplementaarsed järjestused, hübridiseeruvad nad kromosoomi spetsiifiliste piirkondadega. Hübridiseeritud saite saame hõlpsasti jälgida autoradiograafia või immunofluorestsentsi abil. Sondide ettevalmistamine, denatureerimine, hübridiseerimine ja visualiseerimine on kromosomaalse värvimise neli peamist etappi.
Rakenduste osas on kromosomaalne värvimine kasulik kromosoomide ümberkorralduste, murdepunktide tuvastamisel ja kromosoomiväliste materjalide määramisel. Lisaks on see võimas vahend kromosoomide erinevate geenijärjestuste täpseks lokaliseerimiseks mikroskoopilisel tasemel. Lisaks aitab kromosomaalne värvimine kromosoomides soovitud tegelaste geene tuvastada.
Millised on kromosoomiribade ja kromosoomide värvimise sarnasused?
- Kromosoomiriba ja kromosoomide värvimine on kaks tsütogeneetilises analüüsis kasutatavat tehnikat.
- Mõlemad tehnikad visualiseerivad kromosoome tavaliselt metafaasis.
- Need tehnikad võimaldavad tuvastada normaalseid kromosoome ja aberratsioone.
- Lisaks on need tehnikad tõeliselt kasulikud geneetiliste häirete tuvastamisel.
Mis vahe on kromosoomiribadel ja kromosoomide värvimisel?
Kromosoomiriba on värvimistehnika, mis kuvab kromosoomide osi tumedate ja heledate ribadena, mis on eristatavad. Vahepeal on kromosoomivärvimine hübridisatsioonitehnika, mis värvib kromosoomide spetsiifilisi piirkondi järjestusspetsiifiliste sondide abil, mis on fluorestsentsmärgisega. Niisiis, see on peamine erinevus kromosoomiribade ja kromosoomide värvimise vahel. Lisaks tekitab kromosoomide vöötmine kromosoomi pikkuses vaheldumisi tumedaid ja heledaid ribasid, samas kui kromosoomi värvimine tekitab kromosoomide fluorestsentsmärgistusega piirkondi.
Lisaks sõltub kromosoomide triipude moodustumine kromosomaalse DNA võimest värvuda värvainega, samas kui kromosoomide värvimine sõltub molekulaarsest hübridisatsioonist kromosoomide järjestusspetsiifiliste sondidega. See on oluline erinevus kromosoomiribade ja kromosoomide värvimise vahel. Lisaks sellele, erinev alt kromosoomiribadest, nõuab kromosoomi värvimise tehnika järjestusspetsiifilisi fluorestsentsmärgistatud sonde.
Kokkuvõte – kromosoomiriba vs kromosoomivärvimine
Kromosoomide ribastamine ja kromosoomide värvimine on kaks meetodit, mida kasutatakse kromosoomide visualiseerimiseks, tavaliselt metafaasis. Mõlemad meetodid aitavad tuvastada arvulisi ja struktuurseid kromosoomaberratsioone ja geneetilisi haigusi. Kromosoomiriba on värvimistehnika, mis kuvab kromosoomide spetsiifilisi piirkondi tumedates ja heledates ribades, mis on eristatavad. Vahepeal on kromosomaalne värvimine teatud tüüpi hübridiseerimistehnika, mis visualiseerib kromosoomide spetsiifilisi piirkondi, mis on tingitud hübridisatsioonist fluorestsentsmärgistatud järjestusspetsiifiliste sondidega. Niisiis, see on peamine erinevus kromosoomiribade ja kromosoomide värvimise vahel.
