Põhierinevus – HPLC vs LCMS
Vaadakem esm alt HPLC ja LCMS tähendusi, enne kui analüüsime HPLC ja LCMS erinevust. Kromatograafia on keemilise analüüsi eraldustehnika, kus proovi koostisosad eraldatakse kromatograafilise keskkonna läbimisel. See hõlmab ka interaktsiooni proovi, statsionaarse faasi ja liikuva faasiga. HPLC tähistab kõrgjõudlusega vedelikkromatograafiat ja seda kasutatakse vedelikkromatograafia meetodina analüütilises keemias. Vedelikkromatograafia ja massispektroskoopia (LCMS) kombinatsioon on välja töötatud valitud biomolekulide kvantitatiivseks analüüsiks ning see on HPLC-ga võrreldes väga tundlik, täpne ja spetsiifiline analüüsiprotseduur. See on peamine erinevus HPLC ja LCMC vahel. See artikkel tutvustab teile HPLC-d ja LCMC-d, mis tegelevad keemilise analüüsiga, ning arutatakse HPLC ja LCMS-i erinevusi.
Mis on HPLC?
Kõrgefektiivne vedelikkromatograafia (HPLC) on analüütilise keemia populaarne eraldustehnika. Seda kasutatakse peamiselt komponentide eraldamiseks, segu iga komponendi tuvastamiseks ja kvantifitseerimiseks. Varem tunti seda meetodit kõrgsurvevedelikkromatograafiana, kuna see sõltus pumpadest, et juhtida proovisegu sisaldavat survestatud vedelat lahustit läbi tahke adsorbentmaterjaliga täidetud kolonni. Iga proovisegu koostisaine interakteerub erinev alt tahke adsorbendimaterjaliga, mille tulemuseks on erinevate koostisosade voolukiirused. See võib viia koostisosade eraldumiseni, kui need voolavad HPLC kolonnist välja.
HPLC-d on kasutatud mitmesugustes rakendustes, nagu veres D-vitamiini taseme analüüs, sportlaste illegaalne uimastitarbimine, tuvastades nende uriinis uimastijäägid, uurides ja analüüsides keerulise bioloogilise proovi koostisosi. ja ravimite tootmine.
Mis on LCMS?
Vedelikkromatograafia-massispektromeetria (LCMS) on analüütiline meetod, mis ühendab vedelikkromatograafia füüsikalise eraldusvõime massispektromeetria (MS) massianalüüsi võimetega. Vedelikkromatograafia on eraldusmeetod ja laetud osakeste massi ja laengu suhte analüüsimiseks kasutatakse massispektromeetriat. Füüsiline eraldamine saavutatakse tavaliselt HPLC-ga ja alternatiivselt LCMS-iga, mida tuntakse ka kui HPLC-MS. LCMS on domineeriv analüütiline tehnika, millel on HPLC-ga võrreldes väga kõrge täpsus, tundlikkus ja spetsiifilisus. Seega on see kasulik paljudes rakendustes, nagu uurimiseesmärgid, ravimianalüüs, toiduanalüüs jne. LCMS-i kasutatakse peamiselt konkreetse proovi biokeemiliste omaduste eraldamiseks, tuvastamiseks, tuvastamiseks ja kvantifitseerimiseks keerukate keemiliste segude juuresolekul.
Mis vahe on HPLC ja LCMC vahel?
HPLC ja LCMC akronüüm ja määratlus
HPLC: HPLC tähistab kõrgjõudlusega vedelikkromatograafiat. See on eraldustehnika, mida kasutatakse peamiselt komponentide eraldamiseks, segu iga komponendi tuvastamiseks ja kvantifitseerimiseks.
LCMS: LCMS tähistab vedelikkromatograafiat ja massispektromeetriat. See on analüütiline tehnika, mis ühendab vedelikkromatograafia füüsikalise eraldamise võime massispektromeetria (MS) massianalüüsi võimetega.
HPLC ja LCMC omadused
Klassifikatsioon
HPLC: see on ainult vedelikkromatograafia meetod.
LCMS: see on vedelikkromatograafia meetodi ja massispektromeetria meetodi kombinatsioon.
Tõhusus
HPLC: võrreldes LCMS-iga on HPLC analüüs vähem tõhus ja aeglasem.
LCMS: võrreldes HPLC-ga on LCMS-analüüs tõhus ja kiirem.
Tundlikkus
HPLC: LCMS-iga võrreldes on HPLC analüüs vähem tundlik.
LCMS: võrreldes HPLC-ga on LCMS-i analüüs tundlikum.
Konkreetsus
HPLC: võrreldes LCMS-iga on HPLC analüüs vähem spetsiifiline.
LCMS: võrreldes HPLC-ga on LCMS-i analüüs spetsiifilisem.
Täpsus
HPLC: HPLC annab mõnede kemikaalide määramiseks vähem täpseid tulemusi kui LCMS.
LCMS: LCMS annab mõnede kemikaalide määramiseks täpsemad tulemused kui HPLC.
Komponent
HPLC: HPLC-d võib pidada LCMS-i komponendiks.
LCMS: LCMS-i ei saa pidada HPLC komponendiks.
Iooniallikas
HPLC: HPLC seadmes ei ole iooniallikat.
LCMS: LCMS-i seadmes on iooniallikas.
Rakendused
HPLC: ioone, polümeere, orgaanilisi molekule ja biomolekule saab analüüsida HPLC abil.
LCMS: orgaanilisi molekule ja biomolekule saab analüüsida. Erinev alt HPLC-st saab LCMS-i kasutada mittetäielikult eraldunud segude uurimiseks.
Operatsioon
HPLC: HPLC instrumendi diagramm on toodud joonisel 1 ja see sisaldab tavaliselt automaatset proovivõtturit, pumpasid ja detektorit. Proovivõtja sisestab proovisegu liikuvasse faasi (survestatud lahustite, nagu vesi, atsetonitriil ja/või metanool) segu, mis kannab selle kolonni. Pumbad annavad soovitud voolu ja liikuva faasi koostise läbi kolonni. Kolonn täidetakse adsorbendiga, mis on teraline tahke osake, nagu ränidioksiid või polümeerid. Detektor annab signaali, mis on proportsionaalne proovi koostisosa kogusega kolonnis, võimaldades seega valitud proovi koostisosade kvantifitseeritavat analüüsi. HPLC instrumenti juhib ja andmete analüüsi pakuvad digitaalne mikroprotsessor ja kasutajatarkvara.
Joonis 1: HPLC seadme skeem
LCMS: LCMS-i seadme diagramm on toodud joonisel 2. Prooviekstrakt sisestatakse HPLC-st koosnevasse kolonni. See veerg säilitab proovide metaboliidid, mis põhinevad füüsikalistel omadustel, ja erinevad metaboliidid voolavad massispektromeetrisse erinevate ajavahemike järel. Massispektroskoopiat kasutatakse osakeste masside hindamiseks, molekuli elementide paigutuse määramiseks ja molekuli struktuuride selgitamiseks. Siiski tuleks proov ioniseerida, et tekitada laetud molekule, et määrata nende massi ja laengu suhe. Seetõttu koosneb LCMS HPLC-seadmete asemel kolmest täiendavast moodulist, nagu rauaallikas, massianalüsaator ja detektor. Iooniallikas saab muuta gaasifaasi proovi ioonideks ja massianalüsaatoriga, mis rühmitab ioonid nende massi järgi elektromagnetväljade abil. Lõpuks määrab detektor väärtused ja edastab andmed iga proovis sisalduva iooni kohta. LCMS-tehnikat saab kasutada nii kvalitatiivsetes kui ka kvantitatiivsetes rakendustes.
Joonis 2: LCMS-i seadme skeem
Kokkuvõttes on HPLC vedelikkromatograafia meetod, samas kui LCMS on vedelikkromatograafia ja massispektromeetria kombinatsioon. Mõlemal analüüsimeetodil on erinevad omadused, kuid neid saab kasutada toidu koostiste, ravimite ja muude bioaktiivsete molekulide tuvastamiseks ja kvantifitseerimiseks.
