Põhiline erinevus ioonivahetus- ja suuruseralduskromatograafia vahel seisneb selles, et ioonvahetuskromatograafiat kasutatakse ioonsete ainete analüüsimiseks laengu järgi, samas kui suuruseralduskromatograafiat kasutatakse suurte molekulide analüüsimiseks nende suuruse järgi.
Kromatograafia on analüütiline tehnika, mida saab kasutada erinevate segude analüüsimiseks. Kromatograafiatehnikaid nimetatakse ainete analüüsimisel kasutatava parameetri järgi – nt. suuruseralduskromatograafia, ioonivahetuskromatograafia jne.
Mis on ioonvahetuskromatograafia?
Ioonivahetuskromatograafia on analüütiline meetod, mille abil saame analüüsida ioonseid aineid. Sageli on kasulik analüüsida anorgaanilisi anioone ja katioone (st kloriidi ja nitraadi anioone ning kaaliumi, naatriumi katioone). Kuigi see ei ole väga levinud meetod, saame selle abil analüüsida orgaanilisi ioone. Lisaks saame seda tehnikat kasutada valkude puhastamiseks, kuna valgud on teatud pH väärtustel laetud molekulid. Siin kasutame tahket statsionaarset faasi, mille külge saavad laetud osakesed kinnituda. Näiteks võime kasutada vaigu polüstüreeni-divinüülbenseeni kopolümeere tahke kandjana.
Joonis 01: Ioonvahetuskromatograafia teooria
Selle edasiseks selgitamiseks on statsionaarses faasis fikseeritud ioonid, nagu sulfaatanioonid või kvaternaarsed amiini katioonid. Kõik need peaksid seostuma vastasiooniga (vastupidise laenguga iooniga), kui tahame säilitada selle süsteemi neutraalsuse. Kui vastasiooniks on katioon, siis nimetame süsteemi katioonivahetusvaiguks. Kuid kui vastasioon on anioon, on süsteem anioonivahetusvaik. Lisaks on ioonivahetuskromatograafias viis peamist etappi:
- Esialgne etapp
- Sihtmärgi adsorptsioon
- Elueerimise algus
- Elueerimise lõpp
- Regeneratsioon
Mis on suurusvälistuskromatograafia?
Suurustuskromatograafia ehk SEC on analüütiline meetod, mille abil saab segus olevaid molekule eraldada nende suuruse ja molekulmassi järgi. Tavaliselt töötab see suurte molekulidega, mida nimetatakse makromolekulideks. Tavaliselt kasutatakse analüüsiks vesilahust. Siis nimetatakse seda geelfiltratsioonikromatograafiaks. Kui tegemist on orgaanilise lahustiga, nimetatakse seda geelkromatograafiaks.
Geelfiltratsioonkromatograafia on suuruseralduskromatograafia vorm, mille puhul kasutame liikuva faasina vesilahust. Seetõttu on selles tehnikas sageli kasutatav mobiilne faas vesipuhver. Samuti kasutame selle eraldamise jaoks kromatograafilist kolonni ja peame pakkima kolonni poorsete helmestega. Tavaliselt on poorse materjalina kasulikud Sephadex ja agaroos. Seega on need materjalid meie katse statsionaarne faas. Lisaks saame eraldatavate makromolekulide suuruse määramiseks kasutada nende helmeste pooride suurust. See on siiski vaid hinnang.
Joonis 02: Seade suurusvälistuskromatograafiaks
Geelkromatograafia on suuruseralduskromatograafia vorm, mille puhul kasutame liikuva faasina orgaanilist lahustit. Seetõttu saame sel eesmärgil kasutada selliseid lahuseid nagu heksaan ja tolueen. Statsionaarne faas on poorne materjal, sama mis geelfiltratsioonikromatograafias. Seda tehnikat kasutatakse sageli polümeeride ja muude orgaaniliselt lahustuvate materjalide puhul. Selle tehnika toimemeetod on sarnane geelfiltratsioonikromatograafia omaga.
Mis vahe on ioonivahetusel ja suuruskromatograafial?
Kromatograafia on analüütiline tehnika, mida saab kasutada erinevate segude analüüsimiseks. Peamine erinevus ioonivahetus- ja suuruseralduskromatograafia vahel on see, et ioonvahetuskromatograafiat kasutatakse ioonsete ainete analüüsimiseks vastav alt laengule, samas kui suuruseralduskromatograafiat kasutatakse suurte molekulide analüüsimiseks nende suuruse järgi.
All infograafik annab rohkem teavet ioonivahetuse ja suuruseralduskromatograafia erinevuste kohta.
Kokkuvõte – ioonivahetus vs suurusvälistuskromatograafia
Kromatograafia on analüütiline tehnika, mida saab kasutada erinevate segude analüüsimiseks. Peamine erinevus ioonivahetus- ja suuruseralduskromatograafia vahel on see, et ioonvahetuskromatograafiat kasutatakse ioonsete ainete analüüsimiseks vastav alt laengule, samas kui suuruseralduskromatograafiat kasutatakse suurte molekulide analüüsimiseks nende suuruse järgi.
