Peamine erinevus – TLC vs HPTLC
TLC ja HPTLC on kaks keemilist tehnikat, mida kasutatakse segu mittelenduvate komponentide eraldamiseks. Peamine erinevus TLC ja HPTLC vahel on see, et TLC plaadi imaval materjalil on suured osakesed, samas kui HPTLC plaatidel on väga väikesed adsorbeeriva materjali osakesed.
TLC on õhekihikromatograafia. HPTLC on kõrgefektiivse õhukese kihi kromatograafia, mis on TLC meetodiga võrreldes täiustatud tehnika.
Mis on TLC?
TLC ehk õhukese kihi kromatograafia on põhiline keemiline meetod, mida kasutatakse segu mittelenduvate komponentide eraldamiseks. See katse viiakse läbi klaasist, plastist või paberist lehtedega. See leht on kaetud õhukese tselluloosi või silikageeli kihiga (adsorbentmaterjal). Seda õhukest kihti tuntakse TLC statsionaarse faasina. Leht on tuntud kui TLC plaat.
Enne katset märgitakse TLC plaadile pliiatsiga lähtejoon ja ülemine joon. Seejärel määratakse proov kapillaartoru abil mööda seda joont. Pärast seda asetatakse TLC plaat vertikaalselt liikuvasse faasi. Liikuv faas on konteinerisse asetatud lahusti (või lahustite segu). TLC plaadi asetamisel sellesse liikuvasse faasi tuleks baasjoont hoida üle lahusti piiri. Vastasel juhul lahustatakse proov lahustis.
TLC plaadil lastakse mõnda aega liikuvas faasis seista. Seejärel tõuseb liikuv faas aja jooksul kapillaaride toimel plaadist ülespoole. Kui proov on liikuvas faasis lahustuv, tõuseb see koos liikuva faasiga ülespoole.
Selle TLC meetodi taga on põhimõte „sarnane lahustab sarnase”. See tähendab, et polaarsed ühendid lahustuvad polaarsetes lahustites, samas kui mittepolaarsed ühendid lahustuvad mittepolaarsetes lahustites. Statsionaarne faas on tavaliselt silikageel või tselluloos, mis on polaarne ühend. Kasutatav liikuv faas on mittepolaarne lahusti, näiteks heksaan. Seega, kui proov sisaldab mittepolaarseid komponente, migreeruvad need komponendid koos liikuva faasiga ülespoole. Polaarsed komponendid kleepuvad plaadi külge. Liikuvate komponentide hulgas migreeruvad mõõduk alt mittepolaarsed ühendid aeglaselt, samas kui väga mittepolaarsed ühendid kiiresti. Kui lahusti esiosa on jõudnud TLC plaadi ülemise jooneni, võetakse plaat välja ja lastakse kuivada.
Joonis 01: TLC tehnika
Kui proovi komponendid olid värvilised ühendid, peaksid plaadil erinevates kohtades olema värvilised laigud. Kuid kui komponendid olid värvitud, tuleks kasutada mõnda muud tehnikat; näiteks ninhüdriini pihustamine ammoniaagi või amiinide (primaarsed ja sekundaarsed amiinid) tuvastamiseks.
Mis on HPTLC?
HPTLC ehk kõrgefektiivse õhukese kihi kromatograafia on õhukese kihi kromatograafia (TLC) täiustatud vorm. HPTLC eraldusvõime ja täpsus on väga kõrged. Enamikku selle tehnika etappe saab automatiseerida.
HPLC-s kasutatavad plaadid sisaldavad väga väikese suurusega silikageeli osakesi ja geeli tihedus plaadil on kõrge. Plaadi pind on sile ja tagab tõhusa eraldamise. Analüüs on kiirem kui TLC tehnika. Selle meetodi tundlikkus on samuti kõrge. HPTLC abil saab samal plaadil eraldada mitu erinevat proovi ilma proovi ettevalmistamiseta.
Mis vahe on TLC ja HPTLC vahel?
TLC vs HPTLC |
|
| TLC on õhukese kihi kromatograafia. | HPTLC on suure jõudlusega õhukese kihi kromatograafia. |
| Tehnika | |
| See on põhiline keemiline tehnika, mida kasutatakse segu mittelenduvate komponentide eraldamiseks. | See on õhukese kihi kromatograafia (TLC) täiustatud vorm. |
| Tahvel | |
| TLC plaat võib olla valmistatud paberist, plastist või klaasist, millele on lisatud suurte osakestega adsorbent. | HPTLC plaatidel on väga väikesed adsorbeeriva materjali osakesed. |
| Resolutsioon | |
| TLC meetod annab halva eraldusvõime, kui proovil on sarnaste omadustega komponendid. | HPTLC-meetod annab kõrge eraldusvõime. |
| Aeg | |
| TLC tehnika on aeganõudev tehnika. | HPTLC annab tulemusi suurema kiirusega kui TLC meetod. |
Kokkuvõte – TLC vs HPTLC
HPTLC on TLC täiustatud vorm. Peamine erinevus TLC ja HPTLC vahel on see, et TLC plaat võib olla valmistatud paberist, plastist või klaasist, millele on kantud suurte osakestega adsorbentmaterjal, samas kui HPTLC plaatidel on väga väikesed adsorbeeriva materjali osakesed.
