Peamine erinevus – inokuleerimine vs inkubatsioon
Mikroorganisme kasvatatakse laborites ja tööstusharudes erinevatel eesmärkidel, nagu iseloomustamine, eristamine, identifitseerimine, antibiootikumide väljatöötamine, vaktsiinide väljatöötamine, transgeensete (GMO) taimede ja loomade tootmine ning orgaaniliste hapete ekstraheerimine. Neid kasvatatakse kunstlikult sünteesitud kasvusubstraatides või looduslikel substraatidel. Seetõttu tuleks valmistada erinevat tüüpi steriilset värsket söödet ja soovitud mikroorganisme kasvatada puhas- või segakultuurides. Söödet on täiendatud kõigi mikroorganismi kasvuks vajalike toitainetega. Mikroorganismi värskesse söötmesse või substraati viimist nimetatakse inokuleerimiseks. Mikroorganismi piisava kasvu saavutamiseks tuleks aga tagada optimaalsed kasvutingimused. Nõutavate kasvutingimuste (nt temperatuur, niiskus ja pH) tagamise protsessi ning mikroorganismide kasvu võimaldamist söötmes nimetatakse inkubeerimiseks. Seega on peamine erinevus nakatamise ja inkubeerimise vahel see, et inokuleerimine on mikroorganismide viimine kasvusubstraatidesse, samal ajal kui inkubeerimine võimaldab mikroorganismidel kasvada ettenähtud kasvutingimustes.
Mis on pookimine?
Inokuleerimine on protsess, mille käigus viiakse mikroorganismid nende kasvuks sobivasse kasvusubstraati. Teisisõnu võib inokuleerimist määratleda kui protsessi, mille käigus viiakse elusorganismi patogeenne või antigeenne mikroorganism, et stimuleerida antikehade tootmist. Kui inokulatsioon on lõppenud, hakkavad mikroorganismid söötmes kasvama ja paljunema, moodustades nähtavaid kolooniaid.
Mikrobioloogias kasutatakse erinevat tüüpi inokuleerimisvahendeid ja -tehnikaid. Inokulatsioonisilmus, inokuleerimisnõel, vatitupsud, tangid, klaasist preparaadid, dosaatoripipetid on laborites tavaliselt kasutatavad inokuleerimisvahendid. Kõik need materjalid peavad olema saasteainetevabad. Seetõttu tuleb need enne nakatamist steriliseerida sobiva steriliseerimistehnikaga, et vältida saastumist või soovimatute mikroorganismide kasvu söötmes. Vöötplaadi meetod, levitamiskoha meetod, kallatusplaadi meetod, punktnakuleerimine, torkekultuur, kaldkultuur on mitmed inokuleerimismeetodid, mida kasutatakse mikroobilaborites bakterite ja seente kasvatamiseks.
Joonis 01: Bakteri inokuleerimine triibuplaadi tehnikaga
Mis on inkubeerimine?
Mikroorganismidel on erinevad kasvunõuded. Neid tuleks varustada vajalike toitainete, vee, mineraalide, kasvufaktorite, mikroelementide ja muude kasvutingimustega. Pärast mikroobi inokuleerimist värskesse söötmesse tuleks säilitada kasvutingimused, et toetada mikroorganismi kasvu. Protsessi, mis võimaldab mikroorganismidel kasvada söötmes, pakkudes vajalikke kasvutingimusi, nimetatakse inkubeerimiseks. Inokuleeritud kultuuriplaadid võib asetada inkubeerimiseks seadmesse, mida nimetatakse inkubaatoriks. Inkubaatorid on konstrueeritud nii, et kasutaja saab kontrollida temperatuuri, niiskust, gaasi kontsentratsiooni jne vastav alt mikroobide nõuetele.
Millised on mikroobide kasvu faasid?
Kui on tagatud optimaalsed tingimused, kipuvad mikroorganismid kasvama, paljunema ja paljunema, kasutades söötmes olemasolevaid toitaineid. Mikroobide kasvul on söötmes neli erinevat faasi. Pärast inokuleerimist käivitavad nad viivitusfaasi. Viivitusfaasis ei näita mikroobid kiiret kasvu ega paljunemist. Nad hakkavad uue keskkonnaga kohanema ja seal stabiliseeruma. Kui need on reguleeritud, algab teine faas, mis näitab mikroorganismi eksponentsiaalset kasvu. Teist faasi nimetatakse logaritmiliseks faasiks või eksponentsiaalseks faasiks. Logfaasis näitavad mikroobid optimaalset kasvu- ja paljunemiskiirust. Kolmas faas algab pärast logaritmilist faasi, kui toitainete ja muude vajaduste hulk on söötmes piiratud. Statsionaarses faasis muutuvad kasvu- ja suremiskiirused võrdseks ning kasvukõver on sirgjoonel, mis on paralleelne x-teljega. Neljas faas on surmafaas, kus suremus ületab kasvumäära. Mõne päeva pärast mikroobide kasv lakkab, jättes maha surnud kultuuri.
Joonis 02: Mikroobiplaadi inkubaator
Mis vahe on inokuleerimisel ja inkubeerimisel?
Inokuleerimine vs inkubatsioon |
|
| Inokuleerimine on mikroorganismide või mikroorganismide suspensiooni söötmesse viimise protsess. | Inkubeerimine on protsess, mis võimaldab nakatatud mikroorganismidel kasvada vajalikes kasvutingimustes. |
| Kasutatud tööriistad | |
| Inokuleerida saab inokuleerimisnõelte, inokuleerimissilmuste, vativahetükkide, pipettide jne abil. | Inkubeerida saab kultuuriruumis, inkubaatoris, kultuuririiulites jne. |
| Aeg | |
| Inokuleerimine toimub lühikese aja jooksul. | Inkubeerimine võtab mitu tundi kuni päevani. |
| Tingimused säilitatud | |
| Inokuleerimine toimub aseptilistes tingimustes laminaarses õhukapis. | Inkubeerimine toimub sobivate kasvutingimuste tagamisega, nagu temperatuur, niiskus, hapnikukontsentratsioon, valgus jne. |
Kokkuvõte – inokuleerimine vs inkubatsioon
Inokuleerimine ja inkubeerimine on kaks peamist etappi mikroorganismide kasvatamisel laborites. Inokuleerimine on mikroorganismi viimine sobivasse söötmesse või substraati. Inokuleeritud söötmetele tagatakse sobivad kasvutingimused kasvamiseks ja paljunemiseks. Seda protsessi nimetatakse inkubeerimiseks. See on peamine erinevus inokuleerimise ja inkubeerimise vahel. Mikroobilaborites on inkubeerimiseks spetsiaalsed tööriistad ja seadmed. Inkubaator on seade, mis võimaldab mikroorganismidel kasvada kontrollitud temperatuuri, õhutamise, niiskuse jne tingimustes. Inokuleerimine ja inkubeerimine tuleks läbi viia õigetes aseptilistes tingimustes, et vältida saastumist ja ajaraiskamist.
Laadi alla PDF-versioon inokulatsioonist vs inkubatsioonist
Saate alla laadida selle artikli PDF-versiooni ja kasutada seda võrguühenduseta kasutamiseks vastav alt tsitaadi märkustele. Palun laadige PDF-versioon alla siit. Inokuleerimise ja inkubeerimise erinevus.
