Peamine erinevus – valk A vs proteiin G
IgG antikehade, nende alamklasside ja muud tüüpi immunoglobuliinide (IgA, IgE, IgD ja IgM) puhastamine on tavaliselt läbi viidud, kasutades bakterivalke, millel on kõrge afiinsus nende antikehade Fc piirkonna suhtes. Proteiin A ja Protein G on bakteriaalsed rekombinantsed valgud, mis on väga soovitatavad inimeste ja teiste loomade IgG immunoglobuliinide puhastamiseks. Ja ka proteiin A, valk G, valk A/G ja valk L on natiivsed mikroobsed rekombinantsed valgud, millel on spetsiifilised seondumiskohad imetajate IgG antikehade Fc piirkonna jaoks. Peale selle saab neid mikroobseid valke kasutada ka teiste immunoglobuliinitüüpide, nagu IgA, IgE, IgD ja IgM puhastamiseks imetajatel ja muudel loomadel, nagu küülik, hiir, lammas, lehm jne. Valk A seondub inimese antikehadega, mis ei ole IgG antikeha. Kuid see seondub nõrg alt inimese IgG3 alamklassiga ja ei seondu inimese antikeha IgD-ga. Proteiin G seondub kõigi inimese IgG antikehade alatüüpidega ja on mitmekülgsem, kui seondub teiste liikide IgG antikehadega. Valk G ei seondu aga muud tüüpi inimese antikehadega peale IgG. Proteiinil G on suurem afiinsus IgG suhtes kui A-valgul. See on peamine erinevus valgu A ja valgu G vahel.
Mis on proteiin A?
Valk A on defineeritud kui pinnavalk, mille suurus on 42 kDa. A-valku leidub algselt Staphylococcus aureuse rakuseinas. Seda kodeerib "spa" geen. A-valku reguleerivad DNA topoloogia, raku osmolaarsus ja kahekomponendiline süsteem. See mikroobne rekombinantne valk osaleb suurel määral biokeemilistes reaktsioonides, kuna on võimeline seonduma mitut tüüpi antikehadega, nagu IgG, IgA, IgE ja IgM. Niisiis kasutatakse seda mikroobset valku inimese antikehatüüpide puhastamiseks. Sellel on viis homoloogset "Ig" sidumisdomeeni, mis volditakse kolme heeliksi kimpudeks. Iga domeen on võimeline seonduma paljude imetajaliikide immunoglobuliini valkudega, eriti IgG antikehadega. Valk A seondub spetsiifiliselt enamiku immunoglobuliinide Fc piirkonna raske ahelaga.
Mis puudutab inimese VH3 perekonna valke, siis proteiin A seondub Fab piirkonnaga. Rekombinantne valk A on laiem oma võime poolest seonduda teiste inimese antikehadega (IgA, IgE, IgM) peale IgG antikehade. Kuid see seostub nõrg alt inimese IgG3 alamklassiga ja ei seondu inimese IgD antikehaga. Proteiin A on võimeline seonduma ka teiste liikide, näiteks hobuse, küüliku, hiire, koera, ahvi, lehma jne IgG antikehadega.
Joonis 01: Valk A
Valk A mängib Staphylococcus aureuse patogeneesis keskset rolli. See valk hõlbustab bakterite seondumist inimese Von-Willebrandi faktoriga kaetud pinnaga. Seega suurendab see bakteriaalse infektsiooni efektiivsust. A-valk kahjustab ka inimese humoraalset vahendatud immuunsust. Seda mikroobset rekombinantset valku toodetakse tööstusliku fermentatsiooniprotsessi kaudu.
Mis on Protein G?
Valk G on defineeritud kui immunoglobuliini siduv valk, mida ekspresseerivad spetsiifiliselt C- ja D-rühma streptokokibakterid. Sellel on kõrge afiinsus antikehade Fc ja Fab piirkondade suhtes. Proteiin G molekuli suurus on ligikaudu 65 kDa.
Proteiin G on pinnavalk. Immunoglobuliinide seondumisafiinsuse tõttu kasutatakse seda antikehade puhastamiseks. Valk G seondub kõigi inimese IgG antikehade alatüüpidega ja on mitmekülgsem ka teiste liikide IgG antikehadega seondumisel. Kuid see ei seondu teiste inimese antikehatüüpidega (IgA, IgE, IgM, IgD). Valgu G-B1 domeenide voltimine annab tulemuseks globulaarse valgu.
Millised on valgu A ja valgu G sarnasused?
- Mõlemad on mikroobsed valgud.
- Mõlemad on rekombinantsed valgud.
- Mõlemal valgul on kõrge afiinsus inimese IgG antikehade ja selle alamklasside suhtes.
- Mõlemat kasutatakse immunoglobuliinide puhastamiseks.
- Mõlemad valgud võivad seonduda immunoglobuliinide Fc piirkonnaga.
Mis vahe on A-valgul ja G-valgul?
Protein A vs Protein G |
|
| Valk A on määratletud kui 42 kDa suurune pinnavalk, mida algselt leidub Staphylococcus aureuse rakuseinas. | Valk G on defineeritud kui 65 kDa suurune pinnapealne immunoglobuliini siduv valk, mida spetsiifiliselt ekspresseerivad rühma C ja D streptokokibakterid. |
| Bakteritüübi väljendamine | |
| Valku A ekspresseerib Staphylococcus aureus | Valku G ekspresseerivad C- ja D-rühma streptokokibakterid. |
| Molekulaarsuurus | |
| Valk A suurus on 42 kDa. | G-valgu suurus on ligikaudu 65 kDa (G148 valk G-65 kDa ja C40 valk G- 58 kDa). |
| Seondumine inimese seerumi albumiiniga | |
| Valk A ei seondu seerumi albumiiniga. | Proteiinil G on seondumiskohad seerumi albumiiniga. |
| Inimese IgG puhastamine3 Alamklass | |
| Valku A ei saa kasutada inimese IgG3 alamklassi puhastamiseks, kuna see ei seondu inimese IgG3 alamklassi immunoglobuliiniga. | Valku G saab kasutada inimese IgG3 alamklassi puhastamiseks, kuna see seondub inimese IgG3 alamklassi immunoglobuliiniga. |
| Teiste inimese antikehade (IgA, IgE ja IgM) puhastamine | |
| A-valgul on suurem võime seonduda teiste inimese antikehadega peale IgG antikehade. Seega saab seda kasutada teiste inimese antikehade, näiteks; IgA, IgE ja IgM. | Proteiin G seondub kõigi inimese IgG antikehade alatüüpidega. Kuid valk G ei seondu teiste inimese antikehadega, nagu; IgA, IgE ja IgM. Seega ei saa seda kasutada teiste inimese antikehade, näiteks; IgA, IgE ja IgM |
Kokkuvõte – valk A vs proteiin G
Mikroobne rekombinantne valk A, valk G, valk A/G ja valk L on looduslikud bakteriaalsed valgud, millel on spetsiifilised seondumissaidid imetajate IgG antikehade Fc piirkonnaga. A-valgul ja G-valgul on ka seondumiskohad teiste teiste liikide IgG antikehade jaoks. Proteiin A ja proteiin G on bakteriaalsed rekombinantsed valgud, mis on väga soovitatavad inimeste ja teiste loomade IgG immunoglobuliinide puhastamiseks. L-valgul on kõrge afiinsus immunoglobuliini klasside IgG, IgA ja IgM kappa kergete ahelate suhtes. Seega saab valku L lisada nende immunoglobuliinitüüpide puhastamiseks inimestel ja teistel liikidel. Tööstuslikult kasutatakse kõiki neid bakteriaalseid valke praegu immunoglobuliinide nagu; IgG, IgA, IgD, IgE ja IgM. Seda võib kirjeldada kui erinevust valgu A ja valgu G vahel.
Laadi alla PDF-versioon Protein A vs Protein G
Saate alla laadida selle artikli PDF-versiooni ja kasutada seda võrguühenduseta kasutamiseks vastav alt tsitaadi märkusele. Palun laadige PDF-versioon alla siit. Erinevus valgu A ja valgu G vahel
