Põhiline erinevus voolutsütomeetria ja immunohistokeemia vahel seisneb selles, et voolutsütomeetria on meetod, mis kasutab rakkude või osakeste populatsiooni füüsikaliste ja keemiliste omaduste tuvastamiseks ja mõõtmiseks laserkiirt, samas kui immunohistokeemia on meetod, mis kasutab monoklonaalseid ja polüklonaalsed antikehad spetsiifiliste antigeenide tuvastamiseks kudedes.
Vooltsütomeetria ja immunohistokeemia on kaks tehnikat, mida kasutatakse haiguste, eriti vähi diagnoosimiseks. Voolutsütomeetria kasutab rakkude füüsikaliste ja keemiliste omaduste iseloomustamiseks laserkiirt. Immunohistokeemia kasutab monoklonaalseid ja polüklonaalseid antikehi spetsiifiliste antigeenide tuvastamiseks koelõikudes.
Mis on voolutsütomeetria?
Vooltsütomeetria on rakubioloogias populaarne tehnika. See meetod tuvastab ja mõõdab rakupopulatsiooni füüsikalisi ja keemilisi omadusi. Voolutsütomeetriat kasutatakse laialdaselt immunoloogia, molekulaarbioloogia, bakterioloogia, viroloogia, vähibioloogia ja nakkushaiguste seire valdkonnas. See kasutab laserit valgusallikana vedela segu rakkude loendamiseks, sortimiseks ja profileerimiseks. Seetõttu pakub see lahenduses olevate rakkude kiiret mitmeparameetrilist analüüsi.
Joonis 01: voolutsütomeetria
See meetod algab rakuproovi süstimisega voolutsütomeetrisse. Voolutsütomeetril on kolm põhisüsteemi: fluidika (vooluelement), optika (erinevad filtrid, valgusdetektorid ja valgusallikad) ja elektroonika (voolutsütomeetri mõõteriistad). Enne seda tuleks proovi töödelda spetsiifiliste värvainetega, olenev alt analüüsitavatest rakkudest. Seetõttu kasutab see mitmesuguseid fluorestseeruvaid reagente, nagu fluorestseeruvad konjugeeritud antikehad, DNA-d siduvad värvid, elujõulisuse värvid, iooniindikaatorvärvid ja fluorestseeruvad ekspressioonivalgud jne. See seade võimaldab ühe raku voolu läbi laserkiire korraga. Kui valgus hajub läbi raku ja selle komponentide, kiirgab see erineva lainepikkusega ribasid. Nii saab kiiresti uurida kümneid tuhandeid rakke ja kogutud andmeid töödeldakse arvutiga.
Mis on immunohistokeemia?
Immunohistokeemia on meetod, mis kasutab monoklonaalseid ja polüklonaalseid antikehi, et määrata huvipakkuva antigeeni jaotus kudedes. See on histopatoloogias levinud meetod. See on mikroskoopial põhinev immunovärvimise tehnika. See meetod hõlbustab antigeenide selektiivset tuvastamist ja lokaliseerimist koerakkudes, mis põhineb spetsiifilisel seondumisel fluorestsentsmärgistatud antikehadega. Seda tehnikat kasutatakse laialdaselt vähktõve diagnoosimiseks, kuna teatud kasvajate puhul ekspresseeritakse spetsiifilisi kasvaja antigeene de novo või ülesreguleeritakse. See meetod on väga kasulik terapeutilise vastuse ennustamiseks kahe olulise kasvaja puhul, st rinna- ja eesnäärmekartsinoomi korral. Lisaks haiguste diagnoosimisele kasutatakse immunohistokeemiat ravimiarenduse ja bioloogiliste uuringute valdkonnas. Lisaks on immunohistokeemia kasulik nakkusetekitajate tuvastamisel ja kinnitamisel kudedes.
Joonis 02: Immunohistokeemia
See meetod nõuab biopsiaid ja need töödeldakse mikrotoomiga sektsioonideks ja seejärel inkubeeritakse sektsioone sobiva antikehaga. Antigeen-antikehade seondumiskohad visualiseeritakse valgus- või fluorestsentsmikroskoobiga.
Millised on voolutsütomeetria ja immunohistokeemia sarnasused?
- Vooltsütomeetria ja immunohistokeemia on kaks tehnikat, mis kasutavad fluorestseeruv alt märgistatud antikehi.
- Mõlemad tehnikad suudavad tuvastada antigeene raku pinnal või rakkude sees.
- Seega võimaldavad mõlemad tehnikad tuvastada haigusi, eriti nakkushaigusi ja vähki.
Mis vahe on voolutsütomeetrial ja immunohistokeemial?
Vooltsütomeetria on laseril põhinev tehnika, mis tuvastab ja mõõdab rakupopulatsiooni füüsikalisi ja keemilisi omadusi. Immunohistokeemia on mikroskoopial põhinev tehnika, mis võimaldab koerakkudes selektiivselt tuvastada ja lokaliseerida antigeene. Niisiis, see on peamine erinevus voolutsütomeetria ja immunohistokeemia vahel. Veelgi enam, voolutsütomeetria kasutab laserkiirt, samas kui immunohistokeemia vajab antikehi. Voolutsütomeeter on peamine voolutsütomeetria jaoks vajalik instrument, samas kui immunohistokeemia vajab valgus- või fluorestsentsmikroskoopi.
Allpool on toodud tabelina kokkuvõte voolutsütomeetria ja immunohistokeemia erinevustest.
Kokkuvõte – voolutsütomeetria vs immunohistokeemia
Vooltsütomeetria vajab voolutsütomeetrit, immunohistokeemia aga tavalist või fluorestsentsmikroskoopi. Veelgi enam, voolutsütomeetria kasutab laserkiirt, immunohistokeemia aga monoklonaalseid ja polüklonaalseid antikehi. Lisaks on immunohistokeemia maksumus võrreldes voolutsütomeetriaga suhteliselt madal. Seega on see voolutsütomeetria ja immunohistokeemia vahelise erinevuse kokkuvõte. Mõlemad meetodid on kasulikud selliste haiguste diagnoosimisel nagu vähk ja nakkushaigused.
