Peamine erinevus – immunotsütokeemia vs immunohistokeemia
Immunotsütokeemia (ICC) ja immunohistokeemia (IHC) on kaks molekulaardiagnostikas laialdaselt kasutatavat tehnikat, mis tuvastavad ja kinnitavad nii mittenakkushaiguste kui ka nakkushaiguste esinemist rakkudes esinevate molekulaarsete markerite põhjal. Immunotsütokeemia ja immunohistokeemia peamine erinevus on molekul, mida nendes tehnikates analüüsiprotseduurina kasutatakse. ICC puhul kasutatakse primaarseid ja sekundaarseid antikehi, mis on konjugeeritud markeritega nagu fluorestsents, samas kui diagnostiliseks määramiseks kasutatakse IHC, monoklonaalseid ja polüklonaalseid antikehi.
Mis on immunotsütokeemia (ICC)?
ICC kasutab primaarseid ja sekundaarseid antikehi, mis on seotud markeritega, nagu fluorestseeruvad markerid või ensüümid, ning on võimas tuvastamismeetod sihtrakkudel esinevate antigeenide tuvastamiseks, mis võivad olla kas nakkuslikud rakuosakesed või vähi kasvajarakud. Immunotsütokeemia jaoks on vaja kolme tüüpi kontrolle.
- Primary Antibody – kontroll, mis näitab antigeeniga seonduva primaarse antikeha spetsiifilisust
- Secondary Antibody – kontroll, mis näitab, et märgis on spetsiifiline primaarsele antikehale
- Märgise juhtelemendid – näita, et märgistus on lisatud sildi, mitte endogeense märgistuse tulemus.
Joonis 01: Immunotsütokeemia märgistab üksikuid valke rakkudes (siin on sümpaatiliste autonoomsete neuronite aksonites olev türosiinhüdroksülaas näidatud roheliselt).
Primaarne antikehakontroll on iga uue antikeha suhtes spetsiifiline ja seda ei saa iga katse puhul korrata. Sekundaarne antikehade kontroll on kavandatud katses kasutatud primaarse antikeha põhjal ja see sisaldub igas katses. Märgistuskontroll kaasatakse, kui protseduuri tingimust muudetakse, proovi muudetakse või kui leitakse ootamatu märgistus.
ICC kaks peamist rakendust on radioimmuunanalüüs (RIA) ja ensüümseotud immunosorbentanalüüs (ELISA). Kõige sagedamini kasutatav antikeha on immunoglobuliin G.
Mis on immunohistokeemia (IHC)?
Immunohistokeemias sisaldab lähteproov monoklonaalseid ja polüklonaalseid antikehi, et määrata antigeenide olemasolu võõrrakkudes. See meetod põhineb spetsiifilisel antigeeni ja antikeha sidumise reaktsioonil. Tuvastamisel kasutatavaid antikehi saab märgistada erinevate markeritega; need võivad olla fluorestsentsmarkerid, radiomärgistatud markerid või keemilised markerid. Antigeeni ja sihtantikeha vahelise in vitro seondumise hõlbustamise kaudu saab määrata raku konkreetse valgu olemasolu või puudumise.
Joonis 02: Normaalse neeru immunohistokeemiline värvimine CD10-ga
Praegu tegelevad teadlased sihtantikehade väljatöötamisega rakkudes esinevate spetsiifiliste antigeenide jaoks, mis võivad areneda pahaloomuliste kasvajarakkudena või antigeenidena, mis esinevad nakkustekitajates, nagu HIV.
Millised on immunotsütokeemia ja immunohistokeemia sarnasused?
- Reaktsioonid on ICC ja IHC puhul väga spetsiifilised ja täpsed.
- ICC ja IHC rakendused hõlmavad vähi- ja nakkushaiguste diagnostikat.
- Steriilsed tingimused tuleks säilitada mõlemas olukorras ja need tuleks läbi viia in vitro
- Mõlemad tehnikad annavad reprodutseeritavaid tulemusi.
- Mõlemad on kiired.
- Raadiomärgistust, fluorestsentstehnikaid kasutatakse tuvastamismeetoditena nii ICC kui ka IHC puhul.
- Mõlemad põhinevad antigeeni ja antikeha sidumisel.
Mis vahe on immunotsütokeemial ja immunohistokeemial?
Immunotsütokeemia (ICC) vs immunohistokeemia (IHC) |
|
| ICC kasutab primaarsete ja sekundaarsete antikehadega seotud markereid, nagu fluorestseeruvad markerid või ensüümid, ning on võimas tuvastamismeetod sihtrakkudes esinevate antigeenide tuvastamiseks. | IHC on meetod, mis kasutab monoklonaalseid ja polüklonaalseid antikehi, et määrata kindlaks nende antigeenide olemasolu, mis on rakupindadele paigutatud spetsiaalsed valgumarkerid. |
| Näidisallikas | |
| ICC-s kasutatakse proove, mis on saadud kudedest, mis on histoloogiliselt töödeldud õhukesteks lõikudeks. | IHC kasutab proove, mis koosnevad monokihis kasvatatud rakkudest või suspensioonist, mis asetatakse objektiklaasile. |
| Näidise töötlemine | |
| ICC-s peaksid rakud olema läbilaskvad, et hõlbustada antikehade tungimist rakusiseste sihtmärkideni. | IHC-s on rakud enne värvimist formaliiniga fikseeritud, parafiiniga manustatud. |
Kokkuvõte – immunotsütokeemia vs immunohistokeemia
Molekulaardiagnostikat kasutatakse nii mittenakkushaiguste kui ka nakkushaiguste esinemise tuvastamiseks ja kinnitamiseks rakkudes esinevate molekulaarsete markerite põhjal. Molekulaarseteks markeriteks võivad olla valgud või DNA või RNA järjestused; tehnoloogiate, nagu ICC ja IHC, arendamine on sillutanud teadlastele teed haiguse ja selle põhjuse varajases staadiumis tuvastamiseks. Nii ICC kui ka IHC sõltuvad spetsiifilistest reaktsioonidest antikeha ja antigeeni vahel, kuigi proovi allikas. Peamine erinevus immunotsütokeemia ja immunohistokeemia vahel on kahe protseduuri proovide töötlemine.
Laadi alla immunotsütokeemia vs immunohistokeemia PDF-versioon
Saate alla laadida selle artikli PDF-versiooni ja kasutada seda võrguühenduseta kasutamiseks vastav alt tsitaadi märkusele. Palun laadige PDF-versioon alla siit Erinevused immunotsütokeemia ja immunohistokeemia vahel.
