Põhierinevus – DMEM vs EMEM
Loomarakkude kultiveerimine toimub loomade rakuliinide säilitamiseks, et viia läbi palju uurimistegevusi. Loomade rakuliine hoitakse steriilsetes tingimustes ja need nõuavad eritehnikaid. Neid kasutatakse vaktsiinide tootmisega seotud uuringutes, raku käitumise tuvastamiseks kantserogeenide ja mutageenide suhtes ning vähiuuringutes. Rakukultuurisöötmed on loomarakukultuuri õnnestumiseks väga olulised. On olemas erinevat tüüpi rakukultuuri sööde, näiteks Dulbecco modifitseeritud kotkasööde (DMEM) ja Eagle'i minimaalne oluline sööde (EMEM). DMEM on modifitseeritud baaskeskkond, mille aminohapete ja vitamiinide kontsentratsioon on kuni neli korda suurem. See hõlmab ka mõningaid asendusi, mis suurendavad söötme toitainetingimusi. EMEM on üks esimesi loomse rakukultuuri söötme tüüpe, mille on välja töötanud Harry Eagle. See on lihtne põhisööde, mis sisaldab minimaalseid toitainete koostisi. Peamine erinevus kahe söötme vahel on toitainete koostis. EMEM koosneb kultuuri kasvuks vajalikest toitainete minimaalsetest kontsentratsioonidest, samas kui DMEM on palju keerukas sööde, milles on suurenenud aminohapete ja vitamiinide kontsentratsioon.
Mis on DMEM?
Dulbecco’s Modified Eagle’s Medium (DMEM) on modifitseeritud kandjatüüp, mida valmistatakse kaubanduslikult kreemja valge pulbrina. See on kohandatud EMEM-ist ning toitainete koostist muudetakse aminohapete ja vitamiinide kontsentratsiooni suurendamise teel. Aminohapete kontsentratsioon on põhisöötmega võrreldes suurenenud kuni kaks korda. Vitamiini kontsentratsiooni suurendatakse kuni neljakordseks, suurendades seeläbi toitainete sisaldust söötmes.
DMEM-i muudetakse ka rohkemate soolade, nagu raudnitraat, naatriumpüruvaat ja mõned asendamatud aminohapped, nagu seriin ja glütsiin, lisamisega. Samuti muutub glükoosi kontsentratsioon söötmes. Algne koostis koosneb 1000 mg/l glükoosist, samas kui DMEM-is suurendatakse kontsentratsiooni kuni 4500 mg/l. DMEM nõuab ka seerumi söötme lisamist, kuna see ei ole täielik sööde. Kõige sagedamini täiendatakse DMEM-i veiseloote seerumiga (FBS). FBS pakub kultiveerimisprotsessi jaoks vajalikke valke ja kasvufaktoreid.
Söötme pH muutub naatriumvesinikkarbonaadi lisamisel. Söötme pH enne naatriumvesinikkarbonaadi lisamist on umbes 6,80–7,40, samas kui pH pärast naatriumvesinikkarbonaadi lisamist jääb vahemikku 7,60–8,20. Kandja säilitustemperatuur on 2–8 0C.
Joonis 01: DMEM
DMEM-i rakendused
- Et uurida polüoomiviiruse naastude moodustamise võimet hiire embrüonaalsetes rakkudes.
- Kontakti inhibeerimise uuringutes
- Kanarakukultuurides
Mis on EMEM?
Eagle’s Minimum Essential Medium (EMEM) on üks esimesi loomarakuliinide rakukultuuris väljatöötatud söötmeid. Esimesed EMEM-i abil kasvatatud loomarakuliinide tüübid hõlmavad hiire L-rakke ja HeLa rakke. EMEM-meedium on samuti teatud tüüpi muudetud kandja. Harry Eagle sõnastas esmakordselt EMEM-meediumi. EMEM sööde sisaldas asendamatuid aminohappeid ja vitamiine minimaalses kontsentratsioonis, mida rakutüübid nõudsid. Preparaat ei sisaldanud asendamatuid aminohappeid ning glükoosi ja naatriumvesinikkarbonaadi kontsentratsioonid on vähenenud. Kuigi sööde sisaldas tasakaalustatud koguses minimaalseid kasvunõudeid rakkude edukaks kasvuks.
EMEM ei ole täielik meedium. Seetõttu on imetajarakkude edukaks kasvuks vajalik seerumi lisamine. EMEM-i kasutatakse paljude rakkude puhul ja see on rakukultuuri uurijate seas endiselt populaarne sööde.
Millised on DMEM-i ja EMEM-i sarnasused?
- Loomarakukultuuris kasutatakse mõlemat tüüpi söötmeid.
- Mõlemad kandetüübid on vedelad koostised.
- Mõlemad kandjatüübid on põhikandjast muudetud kandjad.
- Mõlemad söötmetüübid sisaldavad kasvuks vajalikke asendamatuid aminohappeid, vitamiine ja anorgaanilisi sooli.
- Mõlemad meediumitüübid on puudulikud. Seetõttu tuleks seerumit lisada.
- Mõlemad kandjatüübid kasutavad süsinikuallikana glükoosi.
- Mõlemal kandjatüübil on kõrgem pH ja neid reguleeritakse naatriumvesinikkarbonaadi lisamisega.
Mis vahe on DMEM-il ja EMEM-il?
DMEM vs EMEM |
|
| DMEM on modifitseeritud põhisöötme tüüp, millel on suurenenud aminohapete ja vitamiinide kontsentratsioon. See hõlmab ka mõningaid asendusi, mis suurendavad söötme toitainetingimusi. | EMEM on Harry Eagle’i poolt välja töötatud üks esimesi loomarakkude kultuurisöötme tüüpe. See on lihtne põhisööde minimaalsete toitainete koostisega. |
| Aminohappe modifikatsioonid | |
| Aminohapete kontsentratsioon on DMEM-söötmes suurenenud kuni kaks korda. | EMEM-is kasutatakse aminohapete minimaalset kontsentratsiooni. |
| Vitamiinide modifikatsioonid | |
| Vitamiini kontsentratsioon on DMEM-is kasvanud kuni neljakordseks. | EMEM-is kasutatakse vitamiinide minimaalset kontsentratsiooni. |
| Glükoosi kontsentratsioon | |
| Glükoosi kontsentratsioon on DMEM-is tõusnud kuni 4500 mg/l. | Glükoosi kontsentratsioon on EMEM-is 1000 mg/l. |
| Asendamatute aminohapete olemasolu | |
| Esita DMEM-is. | Ei ole EMEMis. |
| Lisakomponentide olemasolu | |
| DMEM-is on selliseid komponente nagu raudnitraat ja naatriumpüruvaat. | EMEM sisaldab minimaalses koguses toitaineid. |
Kokkuvõte – DMEM vs EMEM
DMEM ja EMEM on kaks populaarset loomarakukultuuri söödet, mis erinevad peamiselt oma toitainete koostise poolest. DMEM on EMEM-i modifitseeritud vorm, kus toitainete kontsentratsiooni suurendatakse koos mõne uue komponendi lisamisega. EMEM on minimaalne sööde ja sisaldab kõiki olulisi tegureid, mis on vajalikud loomsete rakuliinide edukaks kasvuks. Neid söötmeid tuleb kasutada väga steriilsetes tingimustes ja mõlemale söötmele tuleb enne kasutamist lisada seerumit. See on erinevus DMEM-i ja EMEM-i vahel.
Laadige alla PDF DMEM vs EMEM
Saate alla laadida selle artikli PDF-versiooni ja kasutada seda võrguühenduseta kasutamiseks vastav alt tsitaadi märkusele. Laadige PDF-versioon alla siit. Erinevus DMEM-i ja EMEM-i vahel
