Põhiline erinevus fluorestsentsmikroskoopia ja konfokaalse mikroskoopia vahel seisneb selles, et fluorestsentsmikroskoopia puhul ujutatakse kogu proov ühtlaselt valgusallika valgusega, samas kui konfokaalse mikroskoopia puhul puutuvad ainult mõned proovi punktid valguse kätte. valgusallikas.
Fluorestsentsmikroskoopia on oluline analüütiline meetod, mis on kasulik orgaaniliste või anorgaaniliste ainete omaduste uurimisel. Konfokaalne mikroskoopia on analüütiline meetod, mis on kasulik mikrograafi optilise eraldusvõime ja kontrastsuse suurendamiseks, kasutades ruumilist ava, et blokeerida fookusest väljas valgust kujutise moodustamisel.
Mis on fluorestsentsmikroskoopia?
Fluorestsentsmikroskoopia on oluline analüütiline meetod, mis on kasulik orgaaniliste või anorgaaniliste ainete omaduste uurimisel. Instrument, mida me selle mõõtmise jaoks kasutame, on fluorestsentsmikroskoop. See on teatud tüüpi optiline mikroskoop. Seda tüüpi optilises mikroskoobis kasutatakse hajumise, peegelduse, sumbumise ja neeldumise asemel või neile lisaks fluorestsentsi.
Fluorestsentsmikroskoop kasutab kujutise genereerimiseks fluorestsentsi. See võib olla lihtne seadistus nagu epifluorestsentsmikroskoop või keerulisem disain, sealhulgas konfokaalne mikroskoop, mis kasutab optilist sektsiooni. See aitab saada fluorestsentspildi paremat eraldusvõimet.
Joonis 01: Fluorestsentsmikroskoop
Fluorestsentsmikroskoopia põhimõtet silmas pidades peaksime proovi kasutama valgustamiseks kindla lainepikkusega valgusega. Seal neelab proov fluorofooride poolt valgust, mis paneb need kiirgama pikema lainepikkusega valgust. Oluline on eraldada valgustatud valgus palju nõrgemast kiirgavast fluorestsentsist spektraalse emissioonifiltri abil.
Tavaliselt sisaldab fluorestsentsmikroskoop valgusallikat, ergastusfiltrit, kahevärvilist peeglit ja emissioonifiltrit. Valgusallikaks võivad olla ksenoonkaarlamp, elavhõbedaaurulamp, LED-id ja laserid. Dikrootilist peeglit tuntakse ka kui kahevärvilist kiirtejaoturit.
Mis on konfokaalne mikroskoopia?
Konfokaalne mikroskoopia on analüütiline meetod, mis on kasulik mikrograafi optilise eraldusvõime ja kontrasti suurendamiseks, kasutades ruumilist ava, et blokeerida fookusest väljas valgust kujutise moodustamisel. Seda tuntakse ka kui konfokaalset laserskaneerivat mikroskoopiat või laserkonfokaalset skaneerivat mikroskoopiat. See on optilise pildistamise tehnika.
Selles mikroskoopilises tehnikas võimaldab mitme 2D-kujutise jäädvustamine proovis erinevatel sügavustel rekonstrueerida objektis 3D-struktuure. Konfokaalne mikroskoopiline tehnika on laialdaselt kasulik teadus- ja tööstusringkondades. Seda kasutatakse tavaliselt bioteadustes, pooljuhtide kontrollimises ja materjaliteaduses.
Joonis 02: Konfokaalpunkti anduri põhimõte Minsky patendist
Protsessi käigus liigub valgus tavalise mikroskoobi all läbi proovi nii kaugele, kuni see võib tungida, samas kui konfokaalne mikroskoop, mis fokuseerib ainult väiksemat valgusvihku, läbib korraga kitsast sügavustasandit. Selle tehnika töötas välja Marvin Minsky 1957. aastal.
Mis vahe on fluorestsentsmikroskoopial ja konfokaalsel mikroskoopial?
Fluorestsentsmikroskoopia on oluline analüütiline meetod, mis on kasulik orgaaniliste või anorgaaniliste ainete omaduste uurimisel. Konfokaalne mikroskoopia on analüütiline meetod, mis on kasulik mikrograafi optilise eraldusvõime ja kontrasti suurendamiseks, kasutades ruumilist ava, et blokeerida fookusest väljas valgust kujutise moodustamisel. Peamine erinevus fluorestsentsmikroskoopia ja konfokaalse mikroskoopia vahel on see, et fluorestsentsmikroskoopia korral ujutatakse kogu proov ühtlaselt valgusallika valgusega, samas kui konfokaalse mikroskoopia korral puutuvad valgusallika valgusega kokku ainult mõned proovi punktid.
Allpool olev infograafik esitab fluorestsentsmikroskoopia ja konfokaalse mikroskoopia vahelised erinevused kõrvuti võrdlemiseks tabelina.
Kokkuvõte – fluorestsentsmikroskoopia vs konfokaalne mikroskoopia
Fluorestsentsmikroskoopia ja konfokaalne mikroskoopia on kaks optilise pildistamise analüütilist tehnikat. Peamine erinevus fluorestsentsmikroskoopia ja konfokaalse mikroskoopia vahel on see, et fluorestsentsmikroskoopia korral ujutatakse kogu proov ühtlaselt valgusallika valgusega, samas kui konfokaalse mikroskoopia korral puutuvad valgusallika valgusega kokku ainult mõned proovi punktid.
